微生物诱导子对青霉PT95菌株菌核生物量和类胡萝卜素产率的影响.pdfVIP

18卷3期 生物工程学报 U’I 18 N¨-3 2002年5月 矾m5P如Hm耐。，B蛐￡Pc^册钾y M洲2【Ⅺ2 微生物诱导子对青霉P眄5菌株菌核生物量和类胡萝卜素产率的影响 韩建荣+ 黄登宇 刘改花 (山西大学生命科学系．太原030006) 美键词微生物诱导子，菌核生物量，类胡萝h素产率，青霉 中田分类号 09395 文献标识码 A 文章编号10(】0—306l(2002)03—0369一04 菌核是许多丝状真菌形成的 种休眠体。我们从土壤 卡氏菌(M岫rdm 中分离到一株经鉴定属于nn拓删吼fbmⅡsdes的【珊5青由本吏验室分离，分别保存在营养琼脂和蛋白胨查氏琼脂斜 霉菌株，该菌株能在同态培养基上形成大量坚硬的砂粒状的 面卜． 1．2诱导子的制备 菌棱(直径约300￡珊)。m5菌株的菌桉与众不同之处在于 可以积累以B_胡萝h素为主的类胡萝h素…。菌饭的形成， 将用米制备诱导子的6种微生物分别接种到相应的液 除了遗传因素外，还受多种因素影响，例如生长环境中的温 体培养基中进行摇床振荡培养。其中．粗糙脉孢菌、紫红曲 5认为 霉在马铃薯葡萄糖}馥体培养基中25。c培养7d；掷抱酵母、深 度、水势(waIer‘10knIlal)、有机物成分等”“。Hawker 红酵母在麦芽汁液体培养基中25℃培养3d；N89在营养肉汤 对真菌的营养生长(ve旷taIivegrowtll)有利的物质也对菌核生 长有利。我们在以前的研究中电证实了合适的氯、碳源以及 培养基中28℃培养5d；A05在蛋白胨查氏液体培养慕中 植物油的补充有利于提高P195的菌核生物量“1。然『f『『，菌28。c培养lOd。分别收集培养好的菌体细胞，按A，en“…方法 棱生物量的提高，只解决了一半问题。如果在得到大鼍菌核 来制备诱导于。取2z(湿重)的菌体细胞．_}fj蒸馏承， 的同时，菌核中积累的类胡萝h素含量也提高了，这才能保 100mmoⅣL和500mm0I儿(I，H72)的PBs缓冲液分别洗涤2 证P195菌株类胡萝h素产率的提高。关于微生物类胡萝h次．超声破碎细胞，离心(4000一min，5mm)收集沉淀，沉淀再 素代谢的生物诱导，可以找到大量的文献报道，例如三孢酸 (4000一唧，5哪)洗涤8次，并莺悬于蒸馏水中，121口C灭蔺 (1h§p0㈣id)能刺激例如如唧m、(‰7印^0m删6咖 20min后．置一200c下储存备用。 等礅生物的类胡萝h素代谢，p芷香酮(B—Ionone)能显著提高 1．3诱导培养 P^，∞m掷6幽妊u脚的类胡萝h素产量。另一方面，已见 有关微生物诱导子(EIicllor)及其被用于在植物细胞悬浮培每种诱导子在培养基中的添加量设计为梯度系列25懈， 养中提高次生代谢物的产量的研究报告o“9．我们在本项 工作中选择和制备了6种微生物诱导子，并研究分析它们在 制备好的诱导子作不同倍数稀释后，加八到查氏琼脂培养基 固态培养条件下对青霉PT95菌株苗核生物量和类胡萝h素中．然后制成平板。以加等量无菌水的平板为对照、每个平 产率的影响。 板采用3点式接人m5菌株，25℃黑暗培养20d所有试验 均设5次重复。 l材料和方法 1．4菌核生物量测定 1．1菌株 将Pr95菌株在查氏平板上形成的呈橙红色菌核用自来 青霉P19