细胞培养箱清洁.docVIP

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细胞培养箱清洁.doc

细胞培养箱的清洁和消毒 ? 1.?? 培养箱消毒:先用纯水擦洗,再用95的酒精擦洗,再照紫外就可以拉!注意周围环境的清洁就不会那么容易污染的拉! 2.?? 我的经验是在补充水时最好把水加热一下,达到培养箱的温度。 3.?? 这么早就养细胞了,我们这里一般是用70%的乙醇擦洗,然后再用0.1%的新洁尔灭擦洗,不放心的话再用高锰酸钾加甲醛1:1比例熏一遍。注意要是熏的话千万注意混合之后马上离开,然后密闭细胞培养室,味道很刺激的。最好在养细胞前消毒,否则,确实没地方放细胞。 4.?? 我们的方法比较简单,先用75%酒精擦拭内壁,通风10分钟,紫外线照射30分钟即可。 5.?? 我们的通常处理是先用75%的酒精擦拭内壁,然后用甲醛+高锰酸钾熏蒸一个晚上,然后通风一整天(同时打开紫外线照射)。 6.?? 我们是把培养箱里的板层拿出来高压一下,箱壁用75%酒精擦一遍,换用诗乐氏擦一遍,再紫外照一夜,效果很好,其他的请高手指教。 7.?? 熏蒸后吹一天是绝对不够的,最起码要一个星期才可以让甲醛散尽,要不细胞长不好的 8.?? 有的培养箱能加热内壁到90度,也有的带有紫外线功能。常规应该每周用酒精擦洗内部一次。具体的操作请参考培养箱的手册,或着咨询培养箱技术支持。使用消毒剂应小心,培养箱内有检测温度、湿度和二氧化碳浓度的传感器,腐蚀性消毒剂或有机溶剂有可能损坏某些器件,请慎用。另外,挥发性的甲醛有毒,易燃、易爆。如果在培养箱内残留甲醛的话,细胞会死光光哦(我实验室的真实故事)。总之,先看培养箱手册,再联系技术支持,方可万无一失啊。 9.?? 常规最好什么也不放!硫酸铜的作用是抑制细菌生长(但多数用在处理污染的孔板)。因为现在的孵箱都有抑菌功能。 10.?? 我们实验室的做法:把平皿高压灭菌后,在无菌操作台内加入适量的灭菌双蒸水或者生理盐水.再加少量新洁尔灭,浓度没关系.细胞养的都可以. 11.?? 我建议 1 最好先把培养箱彻底消毒.具体方法也是用75%的酒精好好清洗培养箱. 2,操作时严格按照无菌操作的原则 3 我认为双抗的更换问题倒是不大,除非你正在使用的是污染的抗生素. 4 尽量减少观看细胞的次数及时间. 12.?? 我们实验室清洁培养箱的方法:用洗衣粉或洗洁精洗一遍——清水冲净——84消毒液洗——清水冲净——75%酒精擦洗一遍 13.?? 这是我们实验室常规的培养箱消毒方法(一般一个月一次),希望对你会有用 14.?? 首先把培养箱里的东西全部取出,放尽培养箱里的三蒸水;反复用三蒸水冲洗培养箱,然后用75%酒精擦3遍,之后再用三蒸水擦3遍;培养箱里的架子先用自来水反复冲洗,然后用蒸馏水、三蒸水、75%酒精各擦3次,于紫外下照射消毒1 h左右;最后将三蒸水(里面应加少许染料)加入培养箱,将消毒好的架子放入即 15.?? 培养箱应放置无菌室,水中应加适量的叠氮钠(防腐)或者硫酸铜,注意空气消毒. 16.?? 消毒培养箱的常用方法有两种: 把细胞移出,记住拧紧瓶盖,通常放在超净台内,室温一两个小时,问题不大。如培养室有空调,也可将空调打开。然后先用75%酒精棉球擦拭培养箱内壁,注意不要漏掉任何一个角落。擦拭两遍后用一蒸水或二蒸水清洗内壁,可多清洗几遍。最后用消过毒的棉球或75%酒精棉球把内壁再擦拭一遍即可。整个操作没有必要在无菌条件下。最后可在培养箱的水里加上亚甲基蓝,混匀即可。亚甲基蓝溶液可起到一定的抑菌杀菌作用。待培养箱内酒精几乎挥发完时,将细胞放入培养箱中。 还有一种办法就是直接用蒸馏水清洗完,然后再用紫外灯照(最好是那种培养箱里就带有紫外灯的,就方便多了。) 通常培养箱是需要定期清洗的,我们室是1-2月清洗一次,当然这要根据细胞养的多少和培养箱使用的频繁程度来决定的。 17.?? 我们实验室液发生过类似事件,我把我们处理过程告诉你,希望对你有帮助: 首先消毒培养箱,如果你们有两个或以上培养箱就好办了,如果只有一个且还有很多其他细胞就麻烦点。只能暂时的放在超净台上。具体如下,中午将空调温度打到最高(也只有31度),超净台开紫外。下午早点来关紫外,将细胞培养瓶盖盖紧,转到超净台内,用75%酒精擦洗培养箱,再用无臭氧型可移动的紫外等照射半小时,然后将细胞放回,松开盖口即可(切记CO2瓶子阀门要关紧啊,不然气全跑光了)。 一般实验室长了霉菌的话,肯定要全部消毒。 再消毒实验室,先把室内空调和消毒柜过滤网都拆下清洗,在锥形瓶内加点高锰酸钾,放在实验室地上,然后倒入甲醛,立马关门走人就可以了。 2天后再开门装好东西,和往常一样开始工作了。由于2天不能做事,个人细胞要先计划好,大家都可以休息两天。 18.?? 我们实验室是将细胞全部取出,酒精擦洗培养相,然后用紫外线照射4小时以上,污染细胞全部丢掉。还有就是培养

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