现代生物技术中的“筛选”问题例析.pdfVIP

生物 ·解题方略 (3)设计一方法(不考虑机械方法)，从 答案 (1)发生 自身环化 (发生任 培养液中分离出杂种细胞，方法 意连接 ) (2)不含 细胞壁 b和 f 二、植物细胞工程中的筛选 问题 解析 此题杂种细胞的筛选方法 在植物体细胞杂交过程中，将 A和 B两 是遗传互补筛选法。利用每一亲本贡献一个 细胞去细胞壁后人工诱导原生质体融合形成 功能正常的等位基因，纠正另一亲本的缺陷， 融合 (AB)，还有未融合体 (A、B)、多元融合 从而使杂种细胞表现正常功能的原理选择杂 体(AA、BB)和嵌合体。但只有AB型细胞是 种细胞。 植物体细胞杂交所需的杂种细胞。因此在原 (1)利用酶的专一性 ，既能有效去除细 生质体融合后还应有一个筛选杂种细胞过 胞壁，又不损害原生质体。 程。常用筛选的方法 (见下图)有：(1)突变 (2)融合细胞可以是同种的两个细胞融 细胞系互补选择法：包括叶绿体缺失互补、营 合(基因型为rrHH或RRhh)，也可是不同种 养缺陷互补、抗性互补和遗传互补等。(2) 的两个细胞融合 (基因型为 RrHh)。 物理特异性差异选择法：利用两个原生质体 (3)基因型为 rrHH或RRhh融合细胞 亲本的物理特异性差异的选择，如根据愈伤 不能在大于 800lx光照下生长 ，杂种细胞 组织的颜色、荧光特性等在显微镜下机械分 (RrHh)能在大于800lx光照下培养 ，能增殖 离杂种细胞。(3)生长特异性差异选择法 ：根 分化 。 据两种原生质体亲本 的生长特异性 (如形 态 、色泽)来选择。 答案 (1)纤维素酶和果胶酶 原生质 原生质体融合 杂种细胞的筛选 杂种 (2)rrHH、RRhh (3)置 于大于800lx光照 体制备 及再生细胞壁 与植物组织培养 植株 下培养，收集分化的细胞 团 例2 下 图为细胞融合 的简略过 三、单克隆抗体制备中的筛选问题 程 (只考虑两个细胞的融合)，若 A、B是 单克隆抗体制备过程 中有两次 的筛 基 因型分别为 rrHH、RRhh两个烟草 品种 选 ：第一次筛选是 B淋 巴细胞与骨髓瘤细 产生的花粉 ，且这两对基 因位 于非 同源染 胞融合后 ，形成 B淋 巴细胞一B淋巴细胞 、 色体上 ，由于一对 隐