Wnt途径在胃癌中异常激活及其与侵袭转移关系研究.pdfVIP

Wnt途径在胃癌中的异常激活及其 与侵袭转移关系的研究 研究生姓名：程晓馨 指导教师：李宏 教授 专业名称：病理学与病理生理学 摘 要 背景与目的 已知Wnt信号途径是一种对细胞增殖和分化具有重要调节作用 的信号传导系统，包括信号启动、分子传递、靶基因转录活化等几个主要环节， 是∑个由多种分子参与、相互影响、相互制约和协同作用的复杂体系。越来越多 的研究证明，Wnt途径除了参与调控发育过程以外，与肿瘤的发生发展也有密切 的关系。当前的一系列的研究证实，在该途径的几个主要环节中，最具代表性和 规律性的因子为以下几个：I．分泌性Wm蛋白是该途径的启动因子。Wnt蛋白是 多基因家族，其中与细胞增殖分化关系较为密切的是Wnt2蛋白。Wnt蛋白与其胞 膜受钵 Frtwaod 结合后，即可将信号由胞外传至胞内，通过Wnt途径中不同组分 的相互作用，传递信息。2，多功能蛋白分子踟：绷∞毗一方面与跨膜分子E-cadherin polyposis coli 和GSK3 glycogensynthase妇me3 等发生结构改变，以致胞浆内游 离的p咖in不能发生磷酸化，而非磷酸化的13-eatenin因不能被蛋白酶降解而在 enhancer lymphoid 为是Wm信号途径的中心环节或信使。3，B—∞自叻i玎与核内转录因子TCF／LEF形 成复合物后，Wnt途径的相关靶基因即可开始转录。这些靶基因包括细胞周期和 凋亡相关基因，生长因子和粘附分子等，均与肿瘤的发生发展密切相关，其中以 CD44和基质金属蛋白酶 matrix ·l· 的因子较具有代表性。 综观Wnt途径参与肿瘤发生发展的研究资料可以发现，虽然己对多种不同肿 瘤的细胞系、临床病例或动物模型进行观察研究，但所涉及的深度、广度、实验 结果和相应的结论尚不尽相同。由于肿瘤具有一定的地域分布特点，欧美国家的 大量研究偏重于结肠癌和乳腺癌，有关胃癌的研究相对较少。然而，胃癌是我国 最常见的恶性肿瘤，因其较强的侵袭和远距离转移的趋向丽居于癌症致死原因之 首位。因此，最近几年wm信号传导途径与胃癌发生发展关系的研究开始引起关 注。当前有关胃癌中Wnt信号通路的异常激活，特别是中心环节p-catenin易位表 达的特点及其意义，虽已形成共识，但与胃癌恶性程度，尤其与侵袭和转移关系 的研究，不仅较少而且存在结论相反的争议。Wnt途径相关因子的研究也多限于 选择l一2个因子所进行的单效应计数观察。同时，Wnt途径关键环节中其他的因 子，如wnt蛋白和TCF，在胃癌组织中的表达情况及与胃癌生物学行为的关系， 则罕有报道。 本课题以临床胃癌术后标本和4个胃癌细胞系为研究对象，胃癌组织按Lauren 法分为肠型和弥漫型两个亚型，并以癌前期病交 萎缩性胃炎和肠上皮化生 和癌旁 和靶基因CD44v6，从RNA和蛋白水平进行总合研究和分步观察，在同一标本上 就上述各因子在胃癌中的异常表达及其与癌细胞的侵袭和淋巴结转移情况进行平 行性的研究和相关性分析，以获得切实的研究资料，并对Wnt信号途径与胃癌发 生发展，特别是与侵袭和转移的关系形成更为可信的论证，进而为胃癌的发病机 制、早期诊断、预看判断、治疗方法的选择等提供新的理论依据。 材料和方法 胃癌组织标本选自大连医科大学肿瘤研究所 省高校癌症基因组学重点实验 室 建立的人癌组织库。本研究基于冰冻组织微阵列和石蜡组织微阵列，结合组 显子3的突变情况。实验数据应用Knlskal-Wallis和Mamm Whimsy检验方法对上 述指标在不同胃癌组织中的表达进行统计分析，Spearman相关分析用于检测其相 关性。 ·2’ 结果 一．13-catenin在胃癌中的易位表达及与肿瘤侵袭深度的关系 胞浆内积聚，49％ 27／55 有核内易位，与非癌组织比较均具有显著差别 P 0．01 。 2．胃癌标本全层切片观察发现，随着癌细胞的侵袭深度，其膜上p-catenin染 色明显减少，并伴随出现核内B—eatenin的积聚。 某些文献报道的p-catenin外显予3的突变。 二．war2和p-catenin的异常表达与胃癌发生发展的关系 1．胃癌组织可见Wnt2的表达和13-catenin的胞浆／胞核积聚，肠型和弥漫型胃 为68％ 13／191和58％ 11／19 ，弥漫型胃癌为47％ 9／19 和47％ 9／19 。 的表达上调和p-cate血的易位与T分期密切相关fp o．05 。 r -0．474，p 0．01 ，表明p-catenin的易位与Wnt途径的启动有关。 1．胃癌组织E．cadherin膜表达明显减少，不同组织形态的癌组织间未见明显 T1，2和T3，4组之间未见差异。 究显示13-catenin的