阿苯哒唑对蚯蚓细胞和分子毒理机制研究.pdf

,gN农竹夫学博f学忙论茁 摘嘤 !!!!!!I—I———————————一 摘要 随着集约化畜牧业的快速发展，兽药的大鼍和不合理使用所0I起的环境污染f¨J题已引起了人 们极大的笑注。但甘前所采用的个体水半上的急慢性毒理实验小能从奉质上反应药物作用于环境 生物的毒性效应，尤其是潜在毒性。随着分子生物学技术在生态毒理学中的戍用，使药物残留的 环境和食品安全的早期诊断成为可能。本研究以蚯蚓作为十壤环境的指示动物，从个体、组织、 细胞、基因水平上研究了兽药阿苯哒唑 ABZ 对蚝蚓的毒理机制，从微观水平对阿苯哒唑等抗 寄生虫药物的环境安全性评价提供依据。研究分为以下几部分： 第一部分，从个体水平上研究了不同ABZ剂量埘蚯蚓存活和生长率的影响。结果表明，粪便 染毒14天蚯蚓的半数致死率为597kg．1。染毒42天的生长实验结果表明，荆景在30kg-1 mg mg l‘94以上在生长后期14—42天明显降低了蚯蚓生长率。 以下对蚯蚓生长没有影响，而剂罱在帅mg 第■部分，研究了ABZ染毒对蚯蚓体不同部位 前、中、后部 的组织酶话性的变化。测 定了100，2∞，4帅，600 mg 和谷胱 肽硫转移酶 GST 活性的变化。结果表明，组织酶活性与染毒浓度、暴露时fBj和蚯蚓 体的部位密切相关。染毒时『玎J越长。毒性反应越明显，其中AP、ATPase埘较低浓度反应比较敏 感，14d时在100 mg培1的酶活性被显著性抑制，但对AP的活性变化比较敏感的部位是前部， 而ATPase敏感部位是中部和后部，这可能与该部位的结构和功能有关。 I‘2。 和高 第三部分，研究了ABZ染毒对蚯蚓的细胞毒性。实验测定了在低浓度 1帅mg k4 两种情况下，第14天的组织细胞显微和超显微结构的变化。结果表明。低 浓度 6∞mg 浓度染毒使皮肤角质层变厚，表现出蚯蚓的皮肤防御机制：但浓度达到600 mg191时，皮肤角 质层变薄，皮肤防御受到破坏；肠道上皮细胞的线粒体、内质网等超显微结构随着染毒浓度增加 损伤程度增加，600 mgl‘g。时，染色质发生凝聚或边集；贮精囊在l∞mgI嘻1时发生了严重损 伤，丈鼍精子细胞的细胞核变形、细胞膜扩张、线粒体空泡化、微管系统破坏、糖原分布紊乱等 病变．看来，ABZ染毒埘蚯蚓的繁殖毒性比较大． 第四部分，研究了ABZ染毒的蚯蚓分子毒性。采用荧光定量RT．PCR技术，研究了不同剂 达变化反应了动物体能量代谢的早期变化。这为该类药物污染的分子毒理标志物的选择提供了新 的手段和理论基础。 关键词；阿苯哒唑，蚯蚓，基因表达，酶活性，超显微结构 tlt喇农竹夫学博 学付论文 摘哽 Abstract of With ofintensivelivestockbecauseofincorrectorexcessiveutilization rapiddevelopment stresses inrecentdecades．theeffeclof medkineouenvironmental veterinary．medicine veterinary hasbeen standard acute and growinginteresting．Themethod，includingtest，growthreproductive response the effectofmedicineon the test，don‘t essentiallytoxicity the ofmolecularin on potentialtoxicity．Withapplication biologyecotoxicology,earlydiagnoses food is toassessthe environmentaland feasible．Theofthe was sarety purpose presentstudy of medicine earthwormsat toxicityveterinary albendazole ABZ on and level，theincludedasfollows： gene study and rateofABZonearthwormwerestudiedatindividuallevel．The growth Firstly,survival that 14 resultsshowedthemedianlethalconcentrationwas597 after mgk91 days．Fromgrowth ratetest kg-1 ，theresults durin942·dayexposuretoABZ 10，30，90，270mg r