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蛇床子的超临界提取工艺及成分分析 　　【摘要】 目的 考察超临界CO2流体提取蛇床子中有效成分的最佳工艺，并对提取物的成分进行分析。方法 单因素考察提取压力、提取温度、提取时间及物料粒度对提取率的影响;用气相色谱-质谱联用(GCMS)方法进行化学成分分析。结果 最佳提取工艺条件为:物料粒度40目，提取压力25 MPa，提取温度50 ℃，提取时间6 h;提取物采用GCMS法分离出26个组分，鉴定了15个成分，占气化产物总量的64.02%。结论 超临界CO2 流体提取技术可用于蛇床子有效成分的提取。 　　【关键词】 蛇床子;超临界CO2;气相色谱-质谱联用技术 　　蛇床子为伞形科植物蛇床[Cnidium monnieri(L.) Cuss.]的干燥成熟果实，始载于《神农本草经》[1],味辛、苦，性温，具温肾壮阳、燥湿、祛风、杀虫的功效[2]。蛇床子中主要含有蛇床子素、欧前胡素、佛手内酯、花椒青内酯、异虎耳草素等香豆素类化合物[3～5]。据近代药理研究，此类成分具有明显的解痉、祛痰、抗过敏[6]、止喘[7]、抗炎[8]等作用。本实验以出油率、提取物中蛇床子素的含量及提取率为指标，着重考察提取压力、提取温度、提取时间及物料粒度等因素对提取率的影响，优选最佳工艺条件，并对提取物采用气相色谱-质谱联用(GCMS)方法进行化学成分分析，为该提取技术应用于蛇床子的工业化生产提供依据。 　　1、仪器与材料 　　HA2315006型超临界萃取装置(江苏南通华安超临界实业公司);Waters HPLC (Waters 515/2487);Diamonsil C18 柱(200 mm×4.6 mm,5 μm);TL9900 色谱工作站;HP5890ⅡGC/HP5972MS气/质联用仪;BP1(nonpolar)石英毛细管柱(60 m×0.22 mm,0.25 μm，澳大利亚SGE公司);十万分之一电子天平(Sartorius)。 　　蛇床子购于广州清平药材市场，经广州中医药大学李卫民教授鉴定为蛇床[Cnidium monnieri(L.) Cuss.] 的干燥成熟果实(HPLC法测定，本品按干燥品计算含蛇床子素为1.90%);蛇床子素对照品(中国药品生物制品检定所，批号：20822-9401)。 　　2、方法与结果 　　2.1SFECO2法提取工艺的基本流程 　　蛇床子粉碎—过筛—置提取釜中—加热加压循环提取(CO2流量为20 L/h)—提取完成从解析釜Ⅰ出料口出料，得淡黄绿色膏状提取物(蛇床子SFE)，计算出油率(每100 g药材得到的提取物的量)。 　　2.2按《中国药典》2005年版一部“蛇床子”项下的含量测定方法(HPLC法)测定提取物中蛇床子素的含量，并计算提取率(每100 g药材得到的提取物中蛇床子素的量与药材中蛇床子素的量的比值)。 　　2.3单因素考察提取工艺 　　2.3.1提取压力对提取率的影响 　　固定提取温度35 ℃、物料粒度40目、提取时间4 h，改变提取压力考察其对提取物的影响，结果见表1。 　　表1提取压力对提取率的影响　略 　　提取压力可直接影响超临界流体的相对体积质量、黏度和扩散系数，从而影响出油率及提取率。试验结果表明：当压力20 MPa时，CO2的单位体积质量较小，相应其溶解能力也较小，所以提取率也较低;压力达到25 MPa时，其溶解能力明显增大，提取率也随着上升;压力继续升高，提取率的变化不明显，考虑到生产效率和安全，最佳的提取压力应控制在25 MPa。 　　2.3.2提取温度对提取率的影响 　　固定提取压力25 MPa、物料粒度40目、提取时间4 h，改变提取温度考察其对提取率的影响，结果见表2。 　　表2提取温度对提取率的影响　略 　　结果表明：温度升高有利于蛇床子中的有效成分溶解到CO2流体中，提高提取率;当温度达到55 ℃以上时，温度升高又降低了CO2的密度而导致溶解能力下降，虽然出油率提高，但蛇床子素的含量及提取率却明显降低，表明此时蛇床子中的其他组分被更多地提取出来。因此，实际生产中可选定温度为50～55 ℃之间。 　　2.3.3提取时间对提取率的影响 　　固定提取压力25 MPa、提取温度50 ℃、物料粒度40目，考察不同提取时间对提取率的影响，结果见表3。 　　表3提取时间对提取率的影响　略 　　结果表明：蛇床子素的提取率随提取时间的增加而增加，随着时间进一步延长，增加幅度逐渐变缓，在提取6 h之后，蛇床子素提取率的增加已不明显。因此，提取时间确定为6 h。 　　2.3.3物料粒度对提取率的影响 　　固定提取压力25 MPa、提取温度50 ℃、提取时间6 h，考察不同物料粒度对提取率的影响，结果见表4。 　　表4 物料粒度对提取率的影响　略 　　结果表明：蛇床子素的提取率随着粉碎粒