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吡咯烷二硫代氨基甲酸盐抑制胆固醇诱导的人肝细胞C反应蛋白的表达_临床医学论文 吡咯烷二硫代氨基甲酸盐抑制胆固醇诱导的人肝细胞C反应蛋白的表达_临床医学论文 作者：唐俊利，徐海燕，刘喜平，钱民章 【摘要】 目的 研究核因子κB(NF-κB)信号通路阻断剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对胆固醇诱导的人肝细胞C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)表达的影响。方法 培养肝细胞L-02并将其分为3个组，即胆固醇作用组、PDTC+胆固醇作用组和对照组，分别作用细胞48 h。采用Western blot和免疫比浊法分别检测细胞内和细胞培养液中CRP含量，比较有无PDTC作用下CRP表达量的变化。结果 胆固醇能显著诱导人肝细胞C反应蛋白的表达(0.05)，且其诱导效应随浓度增加而增强；加入PDTC阻断NF-κB信号通路后，胆固醇诱导人肝细胞CRP基因表达的作用减弱(0.05)。结论 PDTC阻断NF-κB信号通路后，CRP表达量下降，提示NF-κB信号通路可能参与了胆固醇诱导CRP基因表达的过程。 【关键词】 C反应蛋白；胆固醇；动脉粥样硬化；核因子κB 　　ABSTRACT: Objective To study the effects of PDTC on cholesterol induced C-reactive protein gene expression in L-02 cell line. Methods Human hepatocyte cell line L-02 was cultured in vitro; growth-arrested cells were divided into 3 groups, cholesterol group, PDTC+cholesterol group and control group. After 48 h incubation, western blot and immunoturbidimetry assays were carried out to detect intracellular and secreted C reactive protein expression. Results Cholesterol stimulated CRP gene expression in L-02 (0.05) compared with negative control group; After PDTC application, CRP gene expression in all the cholesterol dosage groups (at 6.25 mg/L, 12.5 mg/L, 25.0 mg/L, 50.0 mg/L, respectively) decreased significantly. Conclusion Cholesterol induced L-02 CRP gene expression. CRP gene expression decreased significantly after PDTC application，which indicates that NF-κB might be involved in the cholesterol induced C-reactive protein gene expression in L-02 cell line. 　　KEY WORDS: C reactive protein; cholesterol; atherosclerosis; nuclear factor kappa B(NF-κB) 动脉粥样硬化(atherosclerosis, As)的发病机制仍不完全清楚。脂质浸润学说认为As的发生与脂质代谢紊乱密切相关，胆固醇在As病变形成中起着重要作用，是致As的因素之一［1］。Ross教授［2］在其损伤反应学说的基础上明确提出“动脉粥样硬化是一种炎症性疾病”。C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)作为一种急性期反应蛋白，其水平增高是体内炎症的敏感指标。有研究发现CRP直接参与了动脉粥样硬化的发生和发展［3-5］。近年来的研究发现，血脂水平与血清CRP水平之间有着密切的关系。Ridker等［6］报道，血清总胆固醇升高时CRP也升高；Verhamme等［7］用减低脂质含量的饲料喂养高脂血症的幼猪，4周后发现血脂和血清CRP水平都有显著降低，高胆固醇血症与血清CRP水平升高关系密切，但具体机制尚不明确。在本研究中，我们观察了胆固醇对体外培养的人肝细胞L-02 CRP基因表达的影响，并在此基础上采用核因子κB(NF-κB)信号通路的阻断剂吡