小鼠混合骨髓移植中脾细胞诱导持久稳定嵌合体的作用_临床医学论文.docVIP

小鼠混合骨髓移植中脾细胞诱导持久稳定嵌合体的作用_临床医学论文 小鼠混合骨髓移植中脾细胞诱导持久稳定嵌合体的作用_临床医学论文 作者：吴迪，张梅，贺鹏程，徐汇，李静，蔡瑞波 【关键词】 骨髓移植；嵌合体；移植物抗宿主病；脾细胞 　　摘要：目的 通过小鼠混合骨髓移植模型，将同基因和半相合异基因小鼠骨髓细胞和不同比例脾细胞混合移植给受鼠，探讨诱导持久稳定嵌合体、减轻严重移植物抗宿主病(GVHD)的方法。方法 受鼠60Co全身照射，混合输入同基因和半相合异基因供鼠骨髓，同时将两者脾细胞按不同比例混合回输。测定嵌合体形成，观察GVHD表现及病理学改变，监测移植鼠生存率。结果 小鼠移植后全部存活超过90d，半相合异基因小鼠脾细胞输注剂量和比例对嵌合体形成的水平和嵌合状态的稳定性有显著影响。结论 调整半相合异基因与同基因小鼠脾细胞输注剂量和比例对诱导异体持久植活、避免严重的GVHD的出现具有实际意义。 　　关键词：骨髓移植；嵌合体；移植物抗宿主病；脾细胞 　　Efficacy of splenocytes in inducing stable longterm chimerism in murine　mixed haploidentical MHC matched bone marrow transplant model 　　ABSTRACT: Objective To explore the method of inducing stable chimerism without severe graft versus host disease (GVHD) in murine mixed transplant model. Methods Recipient mice given 60Co wholebody irradiation were infused with syngeneic and H2 haploidentical matched bone marrow plus different proportion of splenocytes. The level of the chimerism of the recipient mice was detected by flow cytometry. The manifestations and histopathological examination of GVHD were observed. The mortality of the recipient mice from GVHD was observed. Results All the mice survived over 90 days. The dose of H2 haploidentical matched splenocytes showed a great influence on the level and stability of chimerism. Conclusion It is critical to adjust the dose of H2 haploidentical matched and syngeneic splenocytes in inducing stable chimerism and avoiding GVHD. 　　KEY WORDS: bone marrow transplant; GVHD; chimera; splenocyte 　　移植物抗宿主病(graft versus host disease, GVHD)和移植排斥一直是骨髓移植存在的障碍。临床上常在移植前去除移植物中的淋巴细胞，或在移植后给予大量的免疫抑制剂来控制移植物抗宿主病。去除移植物中的T淋巴细胞在一定程度上减轻了GVHD，但肿瘤的复发率增大，移植物成活的几率降低，延迟了免疫重建［1］。如果长期应用免疫抑制剂可引起肿瘤、感染和各种代谢性疾病。如何在一个合适的同／异基因成熟淋巴细胞比例下，促进异体移植物的持久植活而又不发生严重的GVHD？本文通过建立小鼠混合半相合骨髓移植模型，调整同基因和半相合异基因小鼠脾细胞输注比例，观察其对形成持久稳定的嵌合体以及GVHD的程度的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物 ①BALB/C小鼠(H2d): 部分作为实验组受鼠，部分为同基因供鼠，均为雌性，体重18-20g；②BALB/C×C57BL/6杂交鼠CB6F1(H2d/b):为半相合异基因供鼠，均为雄性，体重18-20g。供、受鼠为清洁级动物，购于第四军医大学实验动物中心，饲养在该中心层流房千级仓中。 　　1.2 主要试剂和器械 PEH2Kb及FITCH2Kd单克隆抗体购于美国Biolegend公司