尼古丁对巨噬细胞肝X受体α表达及胆固醇外流的影响_临床医学论文.docVIP

尼古丁对巨噬细胞肝X受体α表达及胆固醇外流的影响_临床医学论文 尼古丁对巨噬细胞肝X受体α表达及胆固醇外流的影响_临床医学论文 作者：钱宗杰，曾秋棠，邱龄，肖传实 【摘要】 　　目的 通过研究尼古丁对巨噬细胞的肝X受体α(LXRα)及其下游的基因表达和胆固醇外流的影响，探讨尼古丁对LXR信号系统的作用。方法 分离人外周血单核细胞，并转化为巨噬细胞。在尼古丁的作用下，观察巨噬细胞的aopA介导的胆固醇外流的变化和LXR及其下游一些基因mRNA表达。结果 尼古丁显著影响巨噬细胞中一些涉及胆固醇代谢及炎症反应的基因表达，同时降低aopA介导的胆固醇外流。结论 尼古丁影响巨噬细胞LXR信号途径，促进泡沫细胞形成，使动脉粥样硬化发生发展。 【关键词】 尼古丁；胆固醇外流；巨噬细胞；肝X受体 　　ABSTRACT: Objective To investigate the characteristics of liver X receptor alfa (LXRα) and its target gene expression as well as cholesterol efflux from human macrophages under nicotine. Methods Human monocytederived macrophages were collected. Before apoAImediated human monocytederived macrophage cholesterol efflux, and mRNA expression of LXRα and some of its target genes being detected, the macrophages were induced with or without nicotine. Results Preincubation of human monocytederived macrophages with nicotine,cholesterol efflux was suppressed to apolipoprotein AI. Nicotine also inhibited LXRα and some of its target genes mRNA expression involved cholesterol metabolism, and facilitated expression of some inflammatory genes. Conclusion Nicotine can regulate foam cell formation by inhibiting LXR pathway and produce atherogenesis. 　　KEY WORDS: nicotine; cholesterol efflux; macrophage; liver X receptor 　　动脉粥样硬化的早期病变为血管内皮下富含胆固醇的巨噬细胞聚集，并在各种复杂的机制下，巨噬细胞在动脉壁转变为泡沫细胞，从而启动动脉粥样硬化病变的发生。在巨噬细胞内部，肝X受体(liver X receptor, LXR)及LXR诱导的信号是介导其脂代谢的重要分子基础，也是巨噬细胞的致动脉粥样硬化的重要环节[1]。 尼古丁(nicotine)被认为是烟草中致动脉粥样硬化的一种重要成分，但对其致病机制还知之甚少。Lau等[2]用LDLR-/-小鼠模型，经过尼古丁处理，发现动脉壁局部病变明显增大，一些核因子κB(nuclear factor κB, NF的目的基因表达上调，表现为增强的炎症效应；来自于腹腔的巨噬细胞也呈现这种变化。所以，尼古丁的致动脉粥样硬化作用与其炎症效应相关。本研究旨在探讨尼古丁对LXR信号途径的影响以及对巨噬细胞的胆固醇外流中的作用。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料与试剂 　　21名健康成人外周血液，提取外周血单核细胞作为本研究的实验材料。Ficoll淋巴细胞分层液、20g/L锥虫蓝染液、小牛血清、二甲基亚砜(DMSO)、0.2g/L EDTA(武汉亚法生物公司)，完全RPMI培养液(Gibco公司)，[3H]胆固醇、apoA、TO317(Sigma公司)，佛波酯(phorbol 12公司)，Trizol试剂(Promega公司)，用于RT的试剂和Marker DL公司)，尼古丁(中山生物公司)。 　　1.2 外周血单核细胞的分离 　　抽取患者动脉血10mL，采用Ficoll(密度1.077g/L)密度梯度离心法分离收集外周血单个核细胞。以1×107/mL细胞浓度加入6孔细胞培养板，每孔2mL，置37℃，50mL/