江苏省盐城市时杨中学2012-2013学年高二下学期生物《基因工程-DNA重组技术的基本工具》导学案（人教版）.docVIP

《基因工程——DNA重组技术的基本工具》导学案 编制： 审核： 批准： 【学习目标】 1、简述基因工程的概念含义。 2、简述基因工程的原理。 3、说出DNA重组技术的基本工具及其作用、特点。 【问题情境】 1、什么叫基因工程？ 2、基因工程的基本工具有哪些？ 3、限制性核酸内切酶切割的是DNA特定部位的2个核苷酸之间的氢键还是磷酸二酯键？ 4、最简单的质粒载体必须包括哪三个部分？ 【我的疑问】 备 注 第1页共4页 【自主探究】 一、基因工程的概念和原理 1、基因工程是在 水平上操作、改变生物遗传性状的技术，因此又叫做 。 2、基因工程的原理是： 。 二、基因工程的工具 1、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” （1）分布：微生物。 （2）特点：一种限制酶只能识别一种特定的 ；并在特定部位的2个核苷酸之间的切开 键。 例：EcoRI只能识别GAATTC碱基序列，切割的是G—A之间的键。 （4）DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段，末端通常有两种形式，即 和 。 2、DNA连接酶——“分子缝合针” （1）分类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为DNA连接酶。DNA连接酶只能将 连接起来，不能将双链DNA片段平口末端之间进行连接；另一类是从T4噬菌体分离出来的，称为T4DNA连接酶。T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的 ，又可以“缝合”双链DNA片段的 ，但连接 之间的效率比较低。 （2）DNA连接酶连接的是 键。 3、载体——“分子运输车” （1）载体的作用：将切割下来的 导入受体细胞。 （2）作为载体必须具备以下条件： ①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存； ②具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接； ③具有某些标记基因，便于进行筛选，如对抗生素的抗性基因。 （3）目前通常使用的载体是 ，它是一种相对分子质量较小、独立于拟核DNA之外的环状DNA分子。其他载体还有 和 等。 备 注 第2页共4页 【课堂检测】 例1、以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段，分析回答问题。 (1)其中①和 是由一种限制酶切割形成的 末端，两者要重组成一个DNA分子，所用DNA连接酶通常是 。 (2) 和 是由另一种限制酶切割形成的 末端，两者要形成重组DNA片段，所用DNA连接酶通常是 。 例2、治疗糖尿病用的胰岛素，在过去主要是从动物(如猪、牛)体获得的。自20世纪70年代基因工程发展起来以后，人们开始采用高新技术生产胰岛素，其操作过程如图所示： (1)图中的质粒存在于细菌细胞中，从其分子结构看，可确定它是一种 。 (2)请根据碱基互补配对的原则判断，在连接酶的作用下，甲与乙能否拼接起来，并说明理由。 (3)细菌丙进行分裂后，其中被拼接的质粒也由一个变成两个，两个变成四个……质粒的这种增加方式在遗传学上称为 。目的基因通过表达后，能使细菌产生胰岛素，这是因为基因具有控制 合成的功能。 【回标反馈】 备 注 第3页共4页 【巩固练习】 1、关于限制酶的说法中，正确的是 （ ） A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列 B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C、限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA D、限制酶只存在于原核生物