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生物芯片技术在性病学中的应用进展 分类 皮肤性病学 研究进展 【性传播疾病新进展/傅志宜主编．-北京：人民军医出版社，2009．9】描述为： 生物芯片技术是20世纪90年代中期以来快速发展起来的分子生物学高新技术，是各学科交叉综合的崭新科学。生物芯片技术目前在国内外都取得了较大的进展，近年来该技术在检测性传播疾病病原体、病原体耐药性突变及性传播疾病的诊断中都得到了广泛应用。 为了使临床医师熟悉生物芯片的概念及其在性病学中的应用，本文综述了近年来国内外在本领域中的相关研究进展。 生物芯片的概念 生物芯片技术是融微电子学、生物学、物理学、化学、计算机科学为一体的高度交叉的新技术，不仅对基因功能具有重大的基础研究价值，而且也具有明显的产业化前景。生物芯片是指包被在硅片、尼龙膜等固相支持物上的高密度的组织、细胞、蛋白质、核酸、糖类以及其他生物组分的微点阵。芯片与标记的样品进行杂交，通过检测杂交信号即可实现对生物样品的分析。基因芯片技术主要包括芯片微阵列制备、样品制备、杂交、信号的检测和分析等。蛋白质芯片主要是蛋白质如抗原或抗体在载体上的有序排列，依据蛋白质分子、蛋白质与核酸相互作用的原理进行杂交、检测和分析。从不同的组织内进行活体解剖后取出圆拄状的组织，然后包埋在受体区组内，这样的石蜡块集成体便构成了组织芯片。缩微芯片实验室(lab-on-a-chip)：在固体材质上制造出微型管道网络系统，从而对生化样品进行处理和分析，也称为微型全分析系统。液态芯片又称悬浮阵列流式荧光技术，是基于美国公司研制的多功能流式点阵仪(100)开发的多功能生物芯片平台，它有机地整合了编码微球激光技术、应用流体学、最新的高速数字信号处理器和计算机运算法则，具有很强的检测特异性和灵敏性，可广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究，也是目前惟一得到权威机构和医学界共同认可用于临床诊断的生物芯片平台，它具有重复性好、信噪比高、没有灰区以及高通量的优点，可同时对一个样本中的多种不同目的分子进行分析，可以在35～60min内对96个不同样本进行检测。 基因芯片在病原体研究中的应用 1．人免疫缺陷病毒(HIV)Wout等利用DNA芯片对HIV-1感染不同时间后CD4+T淋巴细胞的基因表达进行研究。结果发现感染后一些基因的表达受到抑制，且在24h时最为明显。其中包括与细胞分裂、转录、翻译和剪接有关的基因。然而整个细胞的活性和信号传递却增强了，这与有大量的病毒产生一致。Pastinen等设计寡核苷酸芯片调查300多例HIV感染的芬兰人，同时设正常对照，发现只在对照者中存在趋化因子受体(CCR5)变异的等位基因，而在HIV患者中甘露糖结合植物血凝素(MBL)变异的等位基因发生率特别高，进一步证实MBL变异的等位基因在HIV-1传播中的危害性。黎志东等建立新的HIV亚型分析方法，并检测其特异性及敏感性。HIV-111个亚型及HIV-2的env基因C2～V3区一段核苷酸序列，点样于经预处理的玻片上，制备成HIV亚型分析基因芯片，并用其对15份HIV阳性样本进行亚型分析，所得结果与目前常用HIV亚型分析方法即基因序列分析法所得结果进行比较，发现结果完全符合，敏感性高、特异性好，并且具有操作简单、省时、价廉等特点，有望推广应用。温颖等以HIV2个基因型(包括9个亚型)的32株典型性代表株和HIV-2特有的vpx序列的保守序列为靶序列，设计长寡核苷酸探针，并制备成Oligo芯片。样品经随机特异性引物PCR标记后与芯片杂交，PCR产物同时进行测序分析。结果：1例HIV患者芯片杂交结果阳性，20名健康对照者血清均为阴性。阳性标本的序列分析表明，芯片杂交结果符合测序的分型结果。结论：此芯片可初步用于检测血清HIVRNA，并对HIV基因(亚)型进行分析。石向东采用HIV基因芯片对9例HIV抗体阳性母亲所生婴幼儿进行检测，其中阳性2例，阴性7例，与抗体确认结果相比，敏感性和特异性均为100％。该方法能够在婴幼儿出生48h即可进行诊断，判断HIV垂直传播的方式，便于干预和治疗。 现在对于HIV检测技术的原理主要是基于蛋白质(抗原或抗体)之间的相互作用。微流控芯片(microfluidicchips)技术具有制备简单、试剂用量少、操作方便等优点，因此在生化分析中的应用越来越受到重视。蒋兴宇等采用静电纺丝技术(electrospinning，ES)制备纳米纤维薄膜，应用于微流控芯片检测HIV。与商业薄膜相比，静电纺丝纳米纤维薄膜具有更大的比表面积，对于被检测物的吸附提高了一个数量级，从而使得检测的灵敏性有很大提高，在1h内就能完成检测工作，使用的试剂为常规用量