解脲脲原体生物群及抗精子抗体与男性不育的相关性探讨.pdfVIP

解脲脲原体生物群及抗精子抗体与男性不育的 相关性探讨 曾文军1。陈群2，皮红泉1，梅艳娟1。王柳均1。曹玉平1 (1东莞市常平人民医院，广东东莞523573；2广东医学院微生物教研室) 摘要：目的探讨解脲脲原体(UU)不同生物群、抗精子抗体(ASA)与男性不育的关系。方法对120例男性 阳性率；分析UU与ASA的相关性。结果观察组UU及其19印生物群与ASA阳性率均明显高于对照组(P 计学意义。结论男性不育的发生与UU及ASA有关；T960生物群更容易引起不育。 关键词：解脲脲原体，生物群；抗精子抗体；聚合酶链反应；不育 中图分类号：R698．2文献标志码：B 文章编号：1002-266X(2011)07-0080-03 解脲脲原体(UU)是泌尿生生殖道中一种常驻(≥150mU／100止)率。 微生物，与多种炎症疾病及不育不孕相关，其致病性 1．3 UU及其生物群检测及鉴定嵋1 可能与特定的亚群(或)基因型存在相关性…。抗 1．3．I UU检测无菌培养皿采集精液，接种子 精子抗体(ASA)是一种自身抗体，是导致男性不育UU液体培养基中。将液体培养基置于37℃恒温 的主要免疫性因素之一。ASA产生的原因有多种 箱中孵育72h，培养基由黄色变成红色判定为UU 学说，其中生殖道感染是重要原因之一。为了解 阳性。取含UU的液体培养基稀释后均匀涂布于 UU不同生物群与ASA及男性不育的关系，我们于A7培养基表面，使之扩散并渗干，置上述温箱中培 2009年6月一2010年4月进行了如下研究。养24-72h。用低倍镜观察琼脂表面菌落的生长情 1资料与方法 况，有典型棕黑色海胆状细小菌落为UU阳性。挑 取单个典型菌落重复接种于液体培养基增菌后，菌 1．1临床资料120例男性不育患者(不育组)，年 a以 液置一20℃冰箱中备用。 龄23～38岁，平均28．9岁。婚后正常性生活2 上不育，无避孕及性功能障碍。排除标准：①淋球菌、 1．3．2 沙眼衣原体、滴虫及梅毒感染；②会阴部外伤及手术、 结核病、幼年期腮腺炎、家族性遗传性疾病等；③明显 (r1960生物群)为标准菌株(深圳晶美公司)，以不 睾丸、附睾、输精管异常及精索静脉曲张。④女方不 含UU的液体培养基作为阴性对照。将保存的标准 孕因素。另选择120例妻子已妊娠6个月以上的男和临床菌株液体培养基自低温冰箱中取出，自然解 200 性作为对照组，年龄22—40岁，平均29．3岁。 冻，吸取400山菌液，13r／rain离心15rain，吸 1．2 ASA检测采用双抗体夹心ELISA法(试剂弃上清液；加入50斗l的蛋白酶K溶液(含0．5％的 10 盒购自华美生物工程有限公司)。抽取静脉血分离 NP40)；55℃冰浴1h；95oC保温灭活蛋白酶K 血清。准备所需板条，依次加入100山标准系列、 min；10000r／min离心0．5rain，取上清液作PCR模 质控物、血清(I：100稀释)；封板37℃水浴1h；洗 板试验。②PcR扩增及琼脂糖凝胶电泳旧J：PCR反 应体系均为：20 u／一Taq酶 涤液洗3次，拍干板条加入100wl酶应用液；封板 fl,M引物各l斗l，2．5 XPCR mM 37℃水浴Ih；洗涤液洗3次，拍干板条；每孔加入 0．5山，10 dNTP混合物4一，DNA模板2一，ddH2036．5斗l， 底物显色剂100出；18—25℃闭光显色10—15 min；每孔加入50一终止剂；30