应用小白鼠对鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗进行效检地研究.pdfVIP

‘31 6’Proceedingso[Symposium nese Branch,Ch VeterinaryMicroorganism As—sociation—of Mic—roo—rga—nis—ms 应用小白鼠对鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗 进行效检的研究‘ 沈志强，刘吉山，王燕，赵 蕾 山东省滨州畜牧兽医研究所山东省畜禽用蜂胶疫苗研究开发推广中心滨州256618) [摘 要]为寻找更好的鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗的效检方法，本研究应用小自鼠代替本 动物“鸡”对鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗进行效检。结果表明，小白鼠免疫体重为18--229，疫 苗免疫剂量为0．3m1只；免疫后10天，攻毒体重为20 289，攻毒剂量为2—3×107CFU／只时，可 代替本动物“鸡”对鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗进行效检，判定标准为免疫组8／10以上保护， 对照组5／5死亡为合格。本效检方法可缩短检验期限7天，降低检验成本，具有更敏感、更特异、更 客观、更简便等特点。 [关键词]小自鼠；鸡；大肠杆菌病；灭活疫苗；蜂胶；效力检验 鸡大肠杆菌病灭活疫苗预防血情型相同的大肠杆菌病在实验室和田间区域试验中均取得了令人满意的 效果。但鸡大肠杆菌病灭活疫苗的实验室效力检验一直是国内外研究的热点和难点问题，目前，国内外均采 用本动物“鸡”作检验动物，效力检验的方法与判定标准主要有“攻毒发病法”、“病变记分法”和“病原检验法” 等，《中华人民共和国兽用生物制品质量检验标准}(2001版)，对鸡大肠杆菌灭活疫苗的效力检验方法，使用 的实验动物为本动物“鸡”，判定标准为“攻毒发病法”。虽然应用“鸡”作鸡大肠杆菌病灭活疫苗的检验动物是 公认的较敏感的试验动物，上述检验方法与判定标准均有一定的可行性，但是，在检验过程中常存在检验结 果难以判定并且检验时间过长，影响结果的主观因素太多等等弊病，如“攻毒发病法”常出现攻毒而不发病； “病变记分法”常常无法准确记分；“病原检验法”，常可检到血情型相同的非致病性大肠杆菌。为探讨鸡大肠 杆菌病灭活疫苗简便而易于判定的效力检验方法与标准，我们根据实验动物的“3R”原则，应用小白鼠来代 替本动物“鸡”进行效力检验，取得了较为满意的结果，现将结果报告如下： 1材料与方法 1．1材料 1．1．1小白鼠：22 259，昆明II系，洁净级，滨州医学院实验动物室提供。 1．1．2鸡：新罗曼，2月龄，普通级，本所试验基地提供。 1．1．3营养肉汤：按标准自制。 1．1．4大肠杆菌标准毒株：01、02、078由山东省滨州畜牧兽医研究所分离鉴定，中国兽药监察所血清型 鉴定。 1．16 0．9％生理盐水：按标准自制。 1．1．7动物饲养隔离器：天津某公司出品。 1．2方法 1 C， 2．1小白鼠最小致死量的测定将大肠杆菌01、02、078分别按2％的种子量接种于营养肉汤中，37 ．基金项目：山东省重大科技攻关项目的一部份 作者简介：沈志强(1963一)，男，山东荣成人，研究员，主要从事预防兽医学与兽医生物制品学的研究开发工作 史国微生物学会兽医微生物专业委员会2003年学术年会 ·317· 静止培养10小时后，分别取5ml置于一无菌小瓶中，摇匀，置4 只，分别接种上述菌液0．05ml，0．1m!，0．2m!，0．3ml，0．4ml。观察并记录小自鼠发病状况。 价蜂胶灭活疫苗(批号为200201 后分别注射1个小白鼠最小致死量的菌液，观察并记录小白鼠发病状况。 1．2．3