元胡多糖的分离纯化与理化性质研究.pdfVIP

元胡多糖的分离纯化及理化性质研究 * 陶移文 田庚元 中科院上海有机化学研究所 上海 200032 摘要: 目的 从元胡中分离元胡多糖 研究其组成性质 并对其多糖进行分离纯化 方法 1. 采用室温水提 醇沉或酮沉 透析和冷冻干燥等方法从元胡药材中提取总多糖 苯酚 硫酸 法测定多糖含量 高效液相色谱测定样品纯度 元素自动分析仪进行元素分析以及TLC和GC进 行糖组成分析 2. 采用 DEAE-cellulose 柱层析和 CM-Sephadex C50 柱层析分离纯化 结果 1. 水提醇沉 YHEP 和水提酮沉(YHAP)所得的元胡总多糖为深褐色 得率分别为5.68 和5.77 多糖含量分别为65.06 和67.00 元素分析结果 YHEP的N C H 含量分别为0.70 39.70 6.49 而 YHAP 的 N C H 含量分别为 1.12 40.62 6.58 TLC 和 GC 结果 表明 YHEP和YHAP都含有Rha Xyl Ara Glc Gal 其中Glc含量最高 2. YHEP经DEAE-cellulose 柱层析和 CM-Sephadex C50 柱层析分离纯化 可得到白色粉末状的元胡多糖 YH-D0-C50,纯度可 达98 结论 醇沉与酮沉提取元胡多糖效果几乎相同 采用DEAE-cellulose柱层析和柱层析 分离纯化 可获得纯度很高的元胡多糖YH-D0-C50 关键词 元胡多糖 提取 分离纯化 DEAE-cellulose CM-Sephadex C50 1. 材料与仪器 1.1 原料 药材购于浙江省新昌县 均为烘干 粉碎成粗粉后使用 1.2 试剂 葡萄糖标准品为Sigma公司产品 无水乙醇(工业级) 丙酮 工业级 苯酚(重 蒸) 浓硫酸 氨水 氯仿 醋酸 盐酸 四硼酸钠 碳酸氢钠 氢氧化钠等均为国产市售分析 纯试剂 1.3 仪器 Labofuge 400R冷冻离心机(德国Heraeus公司) LG 5真空冷冻干燥机(上海市 离心机械研究所) Waterbath B 480真空旋转蒸发仪(德国Buchi公司) 岛津(LC 10AD RID 6A)高效液相色谱仪(日本 Shimadzu 公司) L 200 电光分析天平(日本 Shimadzu 公司) 722 分光光度计(上海分析仪器三厂) 754型分光光度计(上海分析仪器三厂) CARIO ERBA元素自 动分析仪 气相色谱仪 HP6890 BSZ-100 自动部分收集仪 上海泸西分析仪器厂 HL-2 恒 流泵 上海新波无线电厂 紫外吸收测定仪 PERKIN ELMER 2 实验方法与结果 2.1多糖提取 醇沉 元胡药材粗粉 200 g 加入 2000 ml 蒸馏水室温浸泡 过滤 离心 上清液减压浓缩 至500 ml 浓缩液中加入3000 ml的无水乙醇 室温静置24 h 离心除去上清液 沉淀用250 ml 蒸馏水溶解 离心 上清液用透析膜(截留分子量1000)在室温透析48 h 减压浓缩后冷冻干燥 获得总多糖YHEP 结果见表1 酮沉 按上所述 浓缩液加入 3000ml 的丙酮 即 6 倍体积的浓缩液 其余条件同上 获 得总多糖YHAP 结果见表1 表1 元胡总多糖的提取情况 编号 颜色 得率 糖含量 YHEP