青鳞鱼蛋白木瓜蛋白酶控制水解动力学模型地研究.pdfVIP

青鳞鱼蛋白木瓜蛋白酶控制水解动力学模型的研究 孤崮童1堂壹蜢杨萍杨志娟 摘要：本文在假设木瓜蛋白酶恒温控制水解动力学遵循外切酶限制水解动力学历程的前提下， 采用实验方法求出了木瓜蛋白酶恒温控制水解动力学模型。结果表明，木瓜蛋白酶对青鳞鱼蛋自 进行控制水解的动力学模型为： 的理论DH与实际DH基本吻合，该动力学模型具有很强的实用价值。 关键词：青鳞鱼；木瓜蛋白酶；控制水解； 动力学。 我困每年捕获的低值海产品产量十分丰富，目前主要用来制作鱼粉等低值产品，产 品的得率和附加值没有得到有效的提高[6]。近几年来，利用酶水解制取可溶性蛋白， Zunasi 进行海洋低值蛋白源高值化利用的研究已有不少报道。青鳞鱼(Harengula Bleeker)属鲱科鲱亚科青鳞鱼属，又名青皮或柳叶鱼[卜4]。为暖水中上层小型鱼类， 分布于菲律宾、日本、朝鲜和中国沿海，含有丰富的营运价值[7]。但是它个体小又多 细小骨刺，脂肪及血和肉含量高，不宜鲜食，更不耐贮藏[6]。为了提高其利用价值和经 济价值，本研究以木瓜蛋白酶水解青鳞鱼，探讨酶反应各因子及水解程度与可溶性蛋白 得率之间的关系。 hydrolysis)是通过对水解条件、水解 蛋白质的可控酶解(control-enzymatic 度(DH)等研究，确定出水解条件、水解度之间的相互关系，从而推倒出描述蛋白 质酶发水解过程规律的动力学关系式，对于加深对影响蛋白质水解过程因素的理解及 指导实践是有实际意义的。 本文以青鳞鱼蛋白为底物，木瓜蛋白酶解过程的动力学模型，并以数学推导结合 实验结果验证的方法建立动力学模型。 I材料与方法 I．I主要材料与试剂 蛋臼质材料：2002年12月于湛江海洋大学校园外购得新鲜的青鳞鱼，在实验室中用清 水冲洗数次后，用小刀取出鱼片。鱼片再用清水浸泡，手工去掉鱼皮后，再用清水漂洗数次 至水清澈，沥干水分、分装为100克／袋，一18℃冰箱冷冻贮藏备用。剩余的鱼头、骨、内脏 国家基会资助项目 6 及鱼皮作为下脚料也分装为100克／袋，在同样条件下冷冻备用。 木瓜蛋白酶(粉末，200万IU／g)。广西南宁悦丰天然生物工程有限公司。 氢氧化钠，盐酸：，浓硫酸，4％硼酸，混合指示剂，20％中性甲醛，1％酚酞溶液，40％NaOH 溶液，10％三氯乙酸为A溶液等均R。 1．2主要仪器 电热恒温水浴锅(H．H．S)，江苏南通县通海电器厂； 雷磁牌PHS--25型DH计，上海精科雷磁； 雷磁牌m—lA型磁力搅拌器，上海精科雷磁； 飞利浦搅拌器HR2838，广东中山五金器具制造厂： 电动搅肉机(TJl2-A型)，广东番禺市恒联食品机械厂； 光学读数分析天平(TG一328A)，上海伟业仪嚣厂： 离心机(1135型台式多管架低速离心机)，长沙英泰仪器有限公司。 常规实验设备一套 1．3水解度测定方法”1 100％ DH=已水解的肽键数／原料中总肽键数×100％叫(B—c)／(A—c))X 公式中：A：原料中总氨基氮数；B=水解液中的氨基氮数；c=原料游离的氨基氮数。 2结果与讨论 2．1青鳞鱼肌肉蛋白木瓜蛋白酶控制水解的动力学 蛋白质酶法水解过程的 根据MarqllOZ[9】和Tello【10的研究成果及林伟锋‘1”等的数学推导 动力学模型公式(1)所示。 _d(DH)：口。xp[-b．妞)] (1) C／t 木瓜蛋白酶限制性水解蛋白质的反应过程，可以下面公式(2)表示。 肼气—b山+P …(2) 定1 在限柑洼酶解反应过程中，因底物和产物抑制等而导致蛋白酶被钝化的反应公式如下公