核酸的生物合成_百替生物.pdfVIP

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核酸的生物合成_百替生物.pdf

核酸的生物合成 一、知识要点 在细胞分裂过程中通过DNA的复制把遗传信息由亲代传递给子代,在子代的个体发育过程中遗 传信息由DNA传递到RNA,最后翻译成特异的蛋白质;在RNA病毒中RNA具有自我复制的能力,并同 时作为mRNA,指导病毒蛋白质的生物合成;在致癌RNA病毒中,RNA还以逆转录的方式将遗传信息传 递给DNA分子。这种遗传信息的流向称为中心法则。 复制是指以原来DNA分子为模板,合成出相同DNA分子的过程;转录是在DNA(或RNA)分子上合 成出与其核苷酸顺序相对应的RNA(或DNA)的过程;翻译是在以rRNA和蛋白质组成的核糖核蛋白体 上,以mRNA为模板,根据每三个相邻核苷酸决定一种氨基酸的三联体密码规则,由tRNA运送氨基酸, 合成出具有特定氨基酸顺序的蛋白质肽链的过程。 (一) DNA的生物合成 在DNA复制时,亲代DNA的双螺旋先行解旋和分开,然后以每条链为模板,按照碱基配对原则, 在这两条链上各形成一条互补链,这样从亲代DNA的分子可以精确地复制成2个子代DNA分子。每个 14 子代DNA分子中,有一条链是从亲代DNA来的,另一条则是新形成的,这叫做半保留复制。通过 N 15 和 N标记大肠杆菌实验证实了半保留复制。 1.复制的起始点与方向 DNA分子复制时,在亲代分子一个特定区域内双链打开,随之以两股链为模板复制生成两个子代 DNA双链分子。开始时复制起始点呈现一叉形(或Y形),称之为复制叉。DNA复制要从DNA分子的特 定部位开始,此特定部位称为复制起始点(originofreplication),可以用ori表示。在原核生物 中复制起始点常位于染色体的一个特定部位,即只有一个起始点。真核生物的染色体是在几个特定部 位上进行DNA复制的,有几个复制起始点的。酵母基因组与真核生物基因组相同,具有多个复制起始 点。 复制的方向可以有三种不同的机制。其一是从两个起始点开始,各以相反的单一方向生长出一条 新链,形成两个复制叉。其二是从一个起始点开始,以同一方向生长出两条链,形成一个复制叉。其 三是从一个起始点开始,沿两个相反的方向各生长出两条链,形成两个复制叉。 2.DNA聚合反应有关的酶及相关蛋白因子 DNA的合成是以四种三磷酸脱氧核糖核苷为底物的聚合反应,该过程除了需要酶的催化之外,还 需要适量的DNA为模板,RNA(或DNA)为引物和镁离子的参与。催化这个反应的酶也有多种:DNA聚 合酶、RNA引物合成酶(即引发酶)、DNA连接酶、拓扑异构酶、解螺旋酶及多种蛋白质因子参与。 3.DNA的复制过程 DNA的复制按一定的规律进行,双螺旋的DNA是边解开边合成新链的。复制从特定位点开始,可 以单向或双向进行,但是以双向复制为主。由于DNA双链的合成延伸均为5′→3′的方向,因此复制 是以半不连续的方式进行,即其中一条链相对地连续合成,称之为领头链,另一条链的合成是不连续 的,称为随后链。在DNA复制叉上进行的基本活动包括双链的解开;RNA引物的合成;DNA链的延长; 切除RNA引物,填补缺口,连接相邻的DNA片段。 (二)逆向转录 service@100 service@100 wwwwww..110000bbiiootteecchh..ccoomm sseerrvviiccee@@110000bbiiootteecchh..ccoomm 在逆转录酶作用下,以RNA为模板,按照RNA中的核苷酸顺序合成DNA,这与通常转录过程中遗 传信息流从DNA到RNA的方向相反,故称为逆向转录。逆转录酶需要以RNA(或DNA)为模板,以四种 2+ 2+ dNTP为原料,要求短链RNA(或DNA)作为引物,此外还需要适当浓度的二价阳离子Mg 和Mn ,沿5 ′→3′方向合成DNA,形成RNA-DNA杂交分子(或DNA双链分子)。逆转录酶是一种多功能酶,它除 了

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