实验一细胞凝集反应和细胞膜的渗透性.ppt

实验一 细胞凝集反应实验二细胞膜的渗透性 【课前预习】 1．土豆凝集素的本质及其使红细胞凝集的原理？ 2．在等渗溶液中细胞一定能维持正常形态吗？ 3．预测红细胞在各种溶液中的溶血速度？ 一、实验目的 1 了解细胞膜的表面结构； 2了解细胞糖被的特点和功能，了解植物凝集素的作用 3了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度 二、实验的原理 1. 细胞凝集反应 细胞膜表面的有分支状糖外被，细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支状糖分子有关。凝集素（lectin）是一类含糖并能与糖分子专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞表面间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 2. 细胞膜的渗透性 在低渗液中，红细胞很快吸水胀裂，称为溶血。在等渗液中，由于有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高，细胞也会吸水胀裂，由于各种物质透入细胞的速度不同，溶血的时间不同 三、实验用品 1. 器材: 显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、烧杯、10ml移液管、试管、试管架 2. 材料: 土豆块茎 3. 试剂: ２％鸭血红细胞、抗凝血剂、PBS、土豆块茎、0.85％生理盐水、2％鸡红细胞、PBS缓冲液、Alsever溶液、0.17M氯化钠、0.17M氯化铵、0.17M醋酸胺、0.17M硝酸钠、0.17M草酸铵、0.17M硫酸钠、0.17M葡萄糖、0.17M甘油、0.17M乙醇、0.17M丙酮 四、实验步骤 (一) 细胞凝集反应 1. 2％鸡血红细胞悬液制备 新鲜鸡血加抗凝剂，生理盐水洗5次，每次2000r/min，离心5min，按红细胞压积用生理盐水配成2％鸡血红细胞悬液。 2. 土豆凝集素制备 土豆2克，加10ml PBS，浸泡2h。 3. 细胞凝集反应 土豆凝集素1滴、2％鸡血红细胞液1滴。 载玻片上混匀，静置20min。 4. 对照 PBS1滴、2％鸡血红细胞液1滴。 （二）细胞膜的渗透性 1. 低渗溶液 试管一支： 鸡血红细胞液1ml； 蒸馏水10ml； 结果溶血，溶液变透明。 2. 等渗溶液 0.17M氯化钠、0.17M氯化铵、0.17M醋酸胺、0.17M硝酸钠、0.17M草酸铵、0.17M硫酸钠、0.17M葡萄糖、0.17M甘油、0.17M乙醇、0.17M丙酮 【实验结果】 1．土豆凝集素能使鸡红细胞凝集，PBS对照液中红细胞分散均匀 2．细胞膜渗透性实验结果比较和分析 【实验报告】 1．简图表示凝集素使血细胞凝集原理 2．怎样根据细胞膜渗透性实验结果分析确定物质进入细胞的速度？物质进入细胞的快慢有什么规律？ * 未溶血 溶血 未凝血 凝血 * * *