生物传感与DNA阵列.docVIP

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生物传感与DNA阵列.doc

生物传感与DNA阵列生物传感器(biosensor)是生物分析化学的一个重要领域,它结合了生命科学、分析化学、物理学和信息科学及其相关技术,能够对所需要检测的物质进行快速分析和追踪。 生物传感器的基本原理生物传感器结构与原理 生物功能膜,又称生物敏感膜(biosensitive membrane)或分子识别件(molecular recognition element)是生物传感器的核心器件,直接影响传感器的功能和质量。换能器的作用是将生物学反应过程各种信息转变成电信号。生物学反应的信息是多元化的生物、化学和物理,微电子学传感技术的成果为检测这些信息提供了丰富的手段,生物传感器设计足够的方法。表81 生物传感器的分子识别件 分子识别元件(生物敏感膜) 生物活性材料 分子识别元件(生物敏感膜) 生物活性材料 酶 全细胞 组织 细胞器 各种酶类 细菌真菌动物植物细胞 动物、植物的组织切片 线粒体,叶绿体 免疫物质 生物亲和物质 核酸 模拟酶 抗体抗原酶标抗原等 配体,受体 寡聚核苷酸 高分子聚合物 表82 生物学反应信息与换能器 生物学反应信息 换能器选择 生物学反应信息 换能器选择 离子变化电阻变化、电导变化 质子变化 气体分压变化 热焓变化 离子选择性电极阻抗计,电导仪 场效应晶体管 气敏电极 热敏电阻,热电偶 光学变化颜色变化(光学范畴) 质量变化 力变化 频率变化 光纤光敏管荧光阻抗光纤,光敏管 压电晶体等 微悬臂梁 表面等离子体共振 生物功能物质与分子识别 生物传感器的分子识别件,主要是来源于生物体的生物活性物质,包括酶、抗原抗体和各种功能蛋白质、抗体核酸、核酸微生物细胞、细胞器、动植物组织等,当它们用作生物传感器的分子识别件时,具有对靶分子(待检测对象)特异的识别功能。分子识别是生物体进行各种简单反应或复杂反应的前奏。分子识别核酸与核酸反应hybridization)、离子在膜中选择性传输和生物与药物、生物分子间弱相互作用等,对研究和开发生物传感器 生物学反应中的物理量的变化 生物反应常常伴随一系列的物理量变化,如热焓、光、颜色、阻抗等,利用这些物理量变化能够设计一些精巧的传感装置。生物反应的热力学 任何生物学反应过程都伴随着热力学变化,如分子、分子间相互作用、生物催化反应等内部或外部的热变化。生物分子三维结构的微量测热法测量分子结构转变过程或前后的热信息可以定蛋白质结构的稳定性。 生物发光 生物发光(bioluminescence)是生物体内特殊物质的氧化而产生的现象。生物发光由荧光素酶(1uciferase)催化萤火虫的ATP依赖性发光反应。 E + ATP + LH2 E-LH2-AMP +PP E-LH2-AMP + O2 E-L-AMP + H2O +h2 显色反应 生物反应中的颜色变化包括生物体内产生色素和生物体或酶与底物作用后色物质两个方面。各种色素是由不同的生物合成途径产生的,每一种途径都包含若干生物化学反应,每一种反应都是由特殊的酶催化的。 生物功能膜的制备 生物膜的模型从层数上来分可分为单层膜、双层膜和多层膜。单层膜主要是指Langmuir-Blodgett(L-B)膜;脂双层膜又包括平板双层膜(planar bilayer)和脂质体(1iposome),平板双层膜又可分为非支撑平板双层膜(又称黑膜,BLM)和支撑平板双层膜(s-BLM);多层膜主要指磷脂铸膜(cast lipid film)。 Langmuir-Blodgett(L-B)膜技术 脂双层膜 多层磷脂膜 固定化生物功能膜 (a) (b) 图8.3 循环伏安法 (a) 电位与时间的关系,线性扫描电位扫至某电位值Em后,再回扫至原来的起始电位值Ei; (b) 典型的循环伏安图(CV), 转换点为回扫的开始 电子传递媒介体生物传感器 无试剂生物传感器 三代电化学生物传感器蛋白质在电极上的直接电化学 蛋白质在金胶纳米粒子电极固定与直接电子传递 图胶体金纳米粒子单层的组装和蛋白质在ITO电极上的固定. 纳米粒子在无试剂生物传感器制备中的应用 生物传感器的应用 生物传感器临床诊断 血糖测定乳酸测定 尿素及尿酸测定 谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)测定 免疫传感器 生物传感器在发酵与食品工业中的应用 氨基酸类 酒精测定 维生素c淀粉测定 过氧化氢测定 果糖测定 DNA阵列 DNA阵列的原理DNA微阵列(DNA microarray)是生物芯片技术之一。将无数预先设计好的寡核苷酸、cDNA或基因组DNA有序地高密度固定排列在载体上(玻璃、硅、塑料等硬质载体)制成点阵,通过与样品中同源核酸进行分子杂交,一

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