化妆品微生物挑战性实验的优化.pdfVIP

化妆品微生物挑战性实验的优化 张太军，陈朝茂，刘迪，李涛，文衍麒 (广东名臣有限公司，广东汕头515834) 摘要：化妆品微生物挑战性实验是评价化妆品防腐体系优劣的常用方法。对国内现有 的化妆品微生物挑战性实验方法进行了优化，使其更适用于国内化妆品行业的研发和 生产。 关键词：化妆品；微生物挑战性实验；防腐体系；优化 化妆品在生产和使用过程中容易受到微生物的污染，为了考查化妆品中防腐体系对微生 物的抗污染能力【k2】，人们不断探索出了各种考查方法，化妆品微生物挑战性实验就是比较公 认的考查方法【3’41。目前世界各国和组织对化妆品微生物挑战性实验还没有统一的标准，国内 同行针对USP法、CTFA法和FDA法分别选用单个菌种进行挑战性实验，方法既繁琐，又没 有充分考虑到实际生产环境微生物污染的弊端15一，采用的是混合标准菌和环境菌进行挑战性 实验同。为了进一步简化操作，本文通过实验对比，在此基础上总结优化出一套更适合生产 实际现状的微生物挑战性实验方法，即混合标准菌与环境菌复合挑战性的实验。 1 实验器具 mL 灭菌接种环；高压蒸汽消毒锅；酒精灯；生化培养箱；灭菌锥形烧瓶(100mL，250 mnl×150ram)； 和500mL)；灭菌培养皿(直径9era)；灭菌刻度吸管(1mL和2mL)；灭菌试管(15 灭菌不锈钢药匙；电子天平(感量0．1D。 2 实验过程 2．1混合标准菌挑战性实验 2．1．1标准菌及试剂 铜绿假单胞菌(Pseudomonas coli， aureues，ATCC6538)、枯草芽孢杆菌黑色变 ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus subtilisvar 种(Bacillus niger，ATCC9372)、黑曲霉(Aspergillusniger，ATCCl6404)、白色假 丝酵母fcandidaalbicans，ATCCl0231)、绳状青霉(Penicilliumfuniculosum，GIM3．103)、绿色木 霉(Trichoderma Tween80 viride，GIM3．139)、卵磷脂一吐温80一营养琼脂培养基(Lifithin Agur)、马铃薯一葡萄糖一琼脂培养基(PDA)和沙堡氏琼脂培养基。 作者简介：张太军(1974-)，男，四川人，工程师。 2013(第九届)中国日用化学工业论坛 2．1．2检测程序 1)标准菌种。 h转 选取3—11代霉菌菌种，应提前1周转管活化后才能用于测试，细菌菌种应提前24 管活化后才能用于测试。 2)实验样品的准备 取待检样品A，B，C各300 mL灭菌锥 g，将供测试的样品分别称取100g装入2个250 形瓶中，用无菌棉塞封好。 3)菌种悬液的制备 mL～6 把准备好的无菌生理盐水，分别倒入各细菌菌种斜面试管中，每管约4 mL，然后 用灭菌不锈钢勺柄分别把细菌菌苔刮洗下来(注意应将斜面上的菌膜一并洗出)。将4种细菌 刮洗液在灭菌100mL锥形瓶中混匀，盖上棉塞，制成混合细菌悬液，最终应控制细菌液菌量 还需6倍一10倍)。 mL～6