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实验专题复习
一、实验分类 1.生化鉴定类实验
名称 实验原理 材料 试剂 规范操作 生物组织中还原糖(模拟尿糖的鉴定)、脂肪、蛋白质的鉴定 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。 苹果、梨
花生种子
大豆种子(或用豆浆),或用鸡蛋蛋白(要稀释,防止黏附试管壁,不易刷洗,反应不充分 斐林试剂(主要由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液配制而成),苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,双缩脲试剂,体积分数为50%的酒精溶液(洗去浮色),蒸馏水。 斐林试剂使用要点:现配现用、沸水浴;徒手切片:左手持材料,右手持刀片,(刀口向内)从左前方向右后方拉刀(臂部用力);双缩脲试剂:先加入A液,再加入B液。 叶绿体中色素的提取和分离
叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮(或无水乙醇)中。叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同:溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。 新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。
丙酮,层析液,二氧化硅(研磨充分),碳酸钙(防止叶绿素被破坏)。
滤液细线要画的细且直(防止色素带重叠),而且要多画几次(增加色素的量使现象更明显);滤纸条插入层析液时,不要让滤液细线接触层析液(防止色素溶于层析液,导致实验失败) DNA的粗提取和鉴定
DNA在氯化钠溶液中的溶解度随着氯化钠的浓度变化而改变。当氯化钠的物质的量浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低,可析出DNA。DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液,可以此提纯DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,。 鸡血细胞液(5~10 mL)。(不用哺乳动物成熟的红细胞原因其没有细胞核,即不含DNA,所以提不到) 体积分数为95%的酒精溶液(实验前置于冰箱内冷却24h),蒸馏水,质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液,物质的量浓度分别为2 mol/L和0.015 mol/L的氯化钠溶液,二苯胺试剂。 7次搅拌,3次过滤,2次向溶液中加入蒸馏水的操作(第一次加蒸馏水使血细胞吸水涨破释放DNA,第二次降低氯化钠浓度析出DNA) 蛋白质的提取与分离 凝胶色谱法(相对分子质量不同的大分子物质通过凝胶时的路程和速度不同,质量大的路程短,速度快)、透析法、离心沉降法、电泳法 哺乳动物成熟红细胞、凝胶 2.显微观察类实验
名称 实验原理 材料 试剂 规范操作 高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动 叶绿体一般是绿色的、扁平的椭球形或球形,可用高倍显微镜观察它的形态和分布。活细胞中的细胞质处于不断流动的状态。观察细胞质的流动,可用叶绿体的运动作为标志。 藓类的叶(或菠菜叶等)。新鲜的黑藻。 显微镜的使用;盖盖玻片:用镊子夹住盖玻片一边,使其另一边接触水滴,慢慢放平(防止产生气泡) 观察植物细胞的有丝分裂 在植物体中,有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞。可用高倍显微镜观察植物细胞有丝分裂的过程,根据各个时期细胞内染色体(或染色质)的变化情况,识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。细胞核内的染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋酸洋红)着色。 洋葱(可以用蒜、葱代替)。
质量分数15%的盐酸,体积分数95%的酒精,质量浓度0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液或醋酸洋红 解离的目的使细胞分离开来;压片:用镊子将根尖弄碎,在盖玻片上再加一片载玻片,用拇指轻轻按压载玻片,目的使细胞分散开。 观察植物细胞的减数分裂 在植物体中,减数分裂常见于胚囊和花药等结构中。在动物体中,减数分裂常见于卵巢和精巢(睾丸)等结构中。用高倍显微镜观察细胞减数分裂的过程,根据各个时期细胞内染色体(或染色质)的变化情况,识别该细胞处于减数分裂的哪个时期。 蚕豆的花药(一般不用雌蕊:因为雌蕊中进行减数分裂的细胞少,不易观察);动物精巢 冰醋酸、无水乙醇、醋酸洋红等 所选材料既要保证有减数分离过程又要保证有较多数目的细胞可进行减数分裂 观察植物细胞的质壁分离和复原
①当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞失水分,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。②由于原生质层比细胞壁的伸缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来,逐渐发生了质壁分离。当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,细胞吸水,逐渐发生质壁分离复原。 紫色的洋葱鳞片叶。
质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液,清水。
引流:从盖玻片一侧滴加XX溶液,另一侧用吸水纸吸引,重复几次。
(一定浓度的KNO3溶液可发生质壁分离并自动复原,原因:K+和NO3-以主动运输方式进入细胞)
3.生理探究类实验
名称 实验原理 材料 试剂 规范操作 比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率 分别用一定数量的过氧化氢酶和Fe3+催
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