加味烂积丸微生物限度检查方法验证的研究.docVIP

加味烂积丸微生物限度检查方法验证的研究 成都九芝堂金鼎药业有限公司 王红涛 加味烂积丸收载于《部颁标准》中药成方制剂第二册89页，由大黄、牵牛子（炒）、陈皮、木香、川木香、21味中药组成，具消积化滞之功效。为保证用药安全有效，确保沉香理气丸的抑菌活性及测定方法的可靠性，在此对本品细菌、霉菌及酵母菌数计数方法及大肠埃希菌的检查方法进行了验证，以确认所采用的方法适合于该药品细菌、霉菌及酵母菌数的测定及大肠埃希菌的检查。具体方法如下： 试验依据：《中国药典》2005版一部微生物限度检查法方法验证试验 细菌、霉菌及酵母菌数测定的方法验证 一.菌液制备 1．取经37℃培养18-24小时，大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌营养肉汤培养物1ml加9ml 0.9%的无菌氯化钠溶液10倍稀释至10-5 ~10-7，为50~100个/ml，做活菌计数备用。 2．取经25℃ 培养24-48小时的白色念珠菌改良马丁液体培养物1ml加9ml0.9%的无菌氯化钠溶液10倍稀释至10-5~10-6，为50~100个/ml，做活菌计数备用。 3．取经25℃培养1周的黑曲霉菌斜面培养物，加3ml0.9%的无菌氯化钠溶液洗下霉菌孢子，吸菌液1ml加9ml0.9%的无菌氯化钠溶液，逐管10倍稀释为10-4~10-5约50~100个/ml，做活菌计数备用。 二.供试液制备 称取加味烂积丸样品10g，加PH7.0无