TaqMan实时荧光PCR快速检测赤羽病病毒.pdfVIP

第十三次学术研讨会会议论文集 TaqMan实时荧光PCR快速检测赤羽病病毒 范晴1花群义2周晓黎2董俊2艾军2叶玲玲2 (1广西兽医研究所，广西南宁，51800l；2，云南出入境检验检疫局，云南昆明，650201) 畸形、以及先天性关节弯曲一积水性无脑综合征(简称AH综合征)的一种虫媒传染病。我国许多省也流行本病，该病 的大规模爆发给畜牧业带来巨大经济损失。本研究根据GenBaIlk登录的赤羽病核蛋白基因S RNA核苷酸序列设计引 物和1aqm柚荧光探针，建立了用于检测赤羽病病毒的实时荧光定量PcR方法。在本研究申，对实时荧光定量PcR 反应条件进行了优化，评估了该方法的特异性、灵敏度和重复性，并建立了绝对定量方法。特异性试验证实，该方 法只能检测到赤羽病病毒，与EHD、BTV、VsV等多种常见的动物病毒没有交叉反应，具有高度的特异性。所制作 的标准曲线表明，在5．8×lO，~5．8×101拷贝数之间有很好的线性关系(瑚．994)，最少可检测到58个拷贝的阳性质粒， 敏感度很高。同一样品于试验内及试验间的重复性试验发现，变异系数分别为