ELISA试剂盒报价表.doc

ELISA试剂盒报价表 子包 项目名称 型号规格 数量 类别 单价（元） 小计 （元） 1 猪瘟病毒抗体检测试剂盒 见下附件一 1 进口 2 猪伪狂犬gB抗体检测试剂盒 见下附件二 1 进口 3 猪瘟病毒抗原检测试剂盒 见下附件三 2 进口 4 猪蓝耳抗体检测试剂盒 见下附件四 1 进口 5 猪伪狂犬gE抗体检测试剂盒 见下附件五 1 进口 合计 附件一：猪瘟病毒抗体检测试剂盒技术参数 （一）试剂数量 用猪瘟病毒抗原包被的ELISA反应板5块。 （二）操作步骤 在使用时，所有的试剂盒组分都必须恢复到室温18～25℃。使用前应将各组分放置于室温至少一小时。 1.分别将50μl样品稀释液加入每个检测孔和对照孔中。 2.分别将50μl的阳性对照和阴性对照加入相应的对照孔中，注意不同对照的吸头要更换。 3.分别将50μl的被检样品加入剩下的检测孔中，注意不同检样的吸头要分开，以防污染。 4.轻弹微量反应板或用振荡器振荡，将反应板中的溶液混匀。 5.将微量反应板用封条封闭或于湿箱中（18～25℃）孵育2小时，也可以将微量反应板用封条封闭或于湿箱中孵育过夜。 6.吸出反应孔中的液体，并用稀释好的洗涤液洗涤3次，注意每次洗涤时都要将洗涤液加满反应孔，弃去反应孔中的洗涤液并拍干反应板。也可以用洗板机洗涤3次，每个反应孔应加300μl左右的洗涤液。注意洗板时要小心，以免样本之间的交叉污染。 7.分别将100μl的抗-CSFV酶标二抗(即取即用)加入反应孔中，用封条封闭反应板并于室温下或湿箱中孵育30分钟。 8.洗板（见6）后，分别将100μl的底物溶液加如反应孔中，并于黑暗的、室温条件下放置10分钟。加完第一孔后即可计时。 9.在每个反应孔中加入100μl的终止液终止反应。注意要按加酶标二抗的顺序加终止液。 10.在450nm处测定样本以及对照的吸光度值，也可用双波长（450nm和620nm）测定样本以及对照的吸光度值。空气调零。 11.计算样本和对照的平均吸光度值。 （三）计算 计算被检样本的平均值OD450（＝ODTEST）、阳性对照的平均值（＝ODPOS）、阴性对照的平均值（＝ODNEG）。 根据以下公式计算被检样本和阳性对照的阻断率；（阳性对照阻断率的计算方法基本一致） ODNEG－ODTEST 阻断率＝————————X 100 ODNEG （四）试验有效性 阴性对照的平均OD450应大于0.50。阳性对照的阻断率应大于50％。 （五）结果判定 如果被检样本的阻断率大于或等于40％，该检样就可以被判为阳性（有CSFV抗体存在）。如果被检样本的阻断率小于或等于30％，该检样就可以被判为阴性（无抗CSFV抗体存在）。如果被检样本的阻断率在30～40％之间，就应过些天再对该动物进行重测。 附件二、猪伪狂犬gB抗体检测试剂盒技术参数 （一）试剂数量 PRV抗原包被的酶标板6块 （二）操作步骤 注意：所有试剂在使用前一律恢复至室温（20~25℃）。试剂应该旋转或颠倒混匀。 1.取出PRV抗原包被板，在记录纸（表）上记录样品位置。 2.加100μl 2倍稀释的阴性对照血清至A1、B1孔。 3.加100μl 2倍稀释的阳性对照血清至C1、D1孔。 4.加100μl处理好样品至相应的孔。 5.全部的单一血清样本和全部的混合血清样本的测试在室温（20~25℃）孵育1小时或2~7℃过夜孵育（16-20小时）；其中从滤纸上得到的洗出液不必稀释，每孔100ul，要在2~7℃过夜孵育（16-20小时）。 6.每孔用大约300μl稀释好的洗液洗涤微孔3~5次。每次洗涤后，甩掉孔内的液体。在甩掉液体后，加入酶标抗体前，避免孔壁变干。在最后一次甩干后，在吸水材料上轻扣板，彻底去掉剩余的液体。 7.每孔加入100μl抗PRV gB酶标抗体。 8.室温（20~25℃）孵育20分钟。 9.重复步骤6。 10.每孔加100μl TMB底物溶液。 11.室温（20~25℃）孵育15分钟。 12.每孔加入50μl终止液终止反应。 13.以空气作为空白对照对酶标仪进行空白设定。 14.在650nm，A（650）测量和记录样品和所有对照的吸光值。 15.计算结果。 （三）试验有效性 要使试验有效，必须满足以下条件： 阴性对照平均值减去阳性对照平均值，其差必须大于等于0.30；如测定结果无效，首先应怀疑是操作技术，并在仔细阅读产品说明后重新检测。针对抗原成分的抗体的存在与否，通过计算每个样品的S/N值来决定。 （四）结果判定 对于血清和全血样本： A快速模式：（1小时孵育/室温：20~25℃） 1.若S/N比值小于或等于0.60，样品为PRV抗体阳性。 2.若S/N比值小于或等于0.70但大于0.60，该样品必须被重测。如果结果相同，则过一段时间