糖的尿素荧光衍生化反应与其分析应用的研究.pdfVIP

分析化学的成就与挑战 糖的尿素荧光衍生化反应及其分析应用的研究+ 杨景和1曹西惠1吴霞‘黄方’王敏1杨育舅2 (t山东大学化学与环境科学学院胶体与界面化学教育部重点实验室济南250100) (z山东大学晶体材料研究所济南250100) 关键词糖尿素荧光 糖类物质以多种形式广泛存在于生物体内，近年来的研究表明，糖类物质是携带着大量信 息的生物分子．在生物体内参与了很多生理作用和病理过程11,21。因而糖分析技术的研究将是糖 生物学的重要研究课题。 近年来糖的色谱技术发展很快，特别是高效液相色谱(1-ELC)和毛细管电泳(cE)由于 具有分离效率高、分析模式多、进样量少、检出限低和分析时间短等特点而发展十分迅速刚。 由于糖分子中既无显色基团又无荧光基团，故糖的衍生化技术151对糖的色谱技术的发展至关重 要。 1实验原理 本研究发现，在硫酸介质中，尿素与糖发生化学反应，并能发射强荧光。对于葡萄糖来说， F11TI和405nm。而其它糖的荧光波长略有变化。研究表明t尿 其最大激发和发射波长分别为338 素与糖间发生如下的缩合反应： H篓《兰E 缩合产物是一共轭体系．故能发射荧光。 2结果与讨论 n1L moLLt在10 实验结果表明．尿素与糖的缩合反应的最佳实验条件如下：尿素浓度为o．15 体积中加入10mL 1：l的H2S04，于沸水浴中加热。生成的产物十分稳定，其体系的荧光}跛 能保持3天咀上。在最佳实验条件下，绘制了几种糖的工作曲线，结果如表1所示。 表1 糖的线性范围和检出艰 {国家19然科学基金和山东省自然科学基金资助项目· 由表可见，表内几种糖在～定浓度范围内与体系的荧光强度成线性关系。大多数糖的检出 限达10。mo／／L，而∞鼠李糖灵敏度较高，其检出限达到10一moVL。利用标准加入法对已知浓 度的葡萄糖、果糖和术糖进行了回收实验，其回收率均在94％咀上。利朋该法对葡萄糖注射液 样品进行了测定，其结果如表2所示。由表可见，该法的准确度和精密度均比较满意， 表2样品测定结果 样品 标准含量(％) 测得值(％) Ⅳ±RSD(％l 50．0 5 葡萄糖注射渣 480，49．0，49 488±1,2 (济南明水利民制药厂1 486，48．8 3结论 综上所述，本文提出了糖的～种新荧光衍生化试剂——尿素。与常用的糖的衍生化试剂相 比，它的分子结构简单，价格低廉且无毒无害，其产物十分稳定等特点。 参考文献 1 王克夷．化学进展，1996，8f2)：98 2 张树政生命的化学，1999，19(3)：103 3 ]t义蚶，魏伟，罗圉安．分析化学，1996，2402)：1459 4 J|103 方积年．魏远安．色谱，1991．9(2 5 黄方，刘晓凌，刷广军．吴霞，杨景和．化学通报f网络版】，2000，2 reactionbetween and its Derivative u瑚．and analytical earhohydrates application CanXihui’WaXia