叶绿素及其检测技术.docVIP

叶绿素及其检测技术 徐长亮 西北农林科技大学食品科学与工程学院 712100 摘 要:绿色是果蔬及其部分制品的重要商品性状，本文通过对叶绿素的结构和稳定性的分析，提出了包括护色、染色等护绿技术；探讨了叶绿素的紫外分光光度法、荧光分析法、光声光谱法和.基于机器视觉技术的叶绿素检测方法等检测技术的优劣。 关键词: 叶绿素；护绿；检测技术；展望 果蔬的色泽是构成产品品质的重要因素,也是检验果蔬成熟衰老的依据,色泽不仅反映果蔬的新鲜度,还可促进人们的食欲,美丽天然的食品颜色是优质果蔬的一个重要特征。果蔬的绿色主要来源于叶 绿素,叶绿素决定了产品的品质特征,同时还具有改善便秘、降低胆固醇、抗突变等生理功能。而叶绿素在果蔬贮藏、加工和货架期极易褪色或者变色,严重影响了产品质量,同时也大大降低了商品价值。而叶绿素含量的测定方法主要有紫外分光光度法、荧光分析法、活体叶绿素仪法、光声光谱法和高效液相色谱法。但是这些检测繁杂、耗时长，精度易受各种因素的影响。因此叶绿素的快速检测技术日益受到关注。 1.叶绿素 1.1叶绿素的化学结构和理化性质 图1叶绿素分子结构及其模型 叶绿素是高等植物进行光合作用的重要物质，结构为一个镁和四个吡咯环上的氮结合以卟啉为骨架的绿色色素的总称[1]。早在1818年，Berzelius就开始了对叶绿素的研究[2]。1933年美国以有机溶剂法为基础，开始工业生产叶绿素，此方法延用至今[3]。图1是叶绿素a的结构和模型。主要有叶绿素a和叶绿素b两种,在一些藻类中还有叶绿素c和叶绿素d。叶绿素是脂溶性色素,不溶于水,可溶于丙酮、乙醇和石油醚等有机溶剂,在颜色上,叶绿素a呈蓝绿色,叶绿素b呈黄绿色,它们的含量之比约为3∶1。叶绿素a和叶绿素b及衍生物的吸收光谱表明,它们在红光区(620~700nm)和蓝紫区(400~500nm)出现了较深的黑带,也就是说,这些光线被叶绿素强烈吸收;而在绿光区(520~580nm)没有黑带,即未被吸收,这也正是叶绿素是绿素的原因。戴荣继等人[4]采用紫外检测器和二极管阵列的三维检测器多次尝试后,最终确定叶绿素a的发射波长为433nm,激发波长为664nm;叶绿素b的发射波长为469nm,激发波长为670nm。 1.2叶绿素的功能应用 食品行业中用来分析叶绿素衍生物添加剂的含量以及食品的色泽。绿色食品近年来受到了人们广泛关注，而存在于绿色植物中的一种独特而重要的营养物质—叶绿素，它的一些生理功能也开始备受重视。叶绿素的结构和血红素极相似，易于被人体吸收，有赋活细胞的作用，在医药、食品和日化工业中有广泛用途，由于叶绿素为天然品，无毒副作用，长期食用安全、可靠，因此，FAO/WHO对叶绿素每人日允许摄入量未作规定。目前，叶绿素已广泛应用于口香糖、硬糖、果汁、琼脂、糕点等食品（但不能用于酸性或含钙食品，否则，易产生沉淀），日本已将其作为绿色色素用在食品添加剂中医药工业上叶绿素具有改善便秘、降低胆固醇、抗衰老、排毒消炎、脱臭、抗癌抗突变、抗贫血、保肝等功能，对皮肤组织有再生作用，可用于治疗烫伤，慢性溃疡，能抑制葡萄球菌和链球菌生长，对齿龈炎、口臭、中耳炎等有一定疗效。另外，叶绿素可以防治感冒，感冒患者可将叶绿素溶液内服涂口唇或含漱，每日数次，1～2 d后症状可减轻。以叶绿素为原料研制治疗缺铁性贫血的叶绿素铁钠盐，提高白血球水平的叶绿素钴钠盐，增强智力和记忆力的叶绿素锌钠盐具有重要价值，由叶绿素制得的叶绿素铜钠盐更是生产治疗肝炎、胃病及十二脂肠溃疡药物的重要原料。叶绿素铜钠盐还是“肝宝”胶囊剂、“胃肝绿”片、“升血宝”、“胃康U”等药物的重要有效成分。日化工业中用作制造香皂、香水、护肤霜、香波及牙膏等产品。因此，叶绿素的市场前景非常广阔，而降低生产成本、简化提取工艺、加强对叶绿素活性的一系列研究将对果蔬产业化应用、食品科学、医药保健等领域产生深远影响[5~7]。 1.3影响叶绿素稳定的因素 果蔬中叶绿素的降解是其色泽退化的根本原因。影响叶绿素稳定的因素有很多，比如光、叶绿素酶、温度、pH、氧气、微生物以及金属离子等[8]。研究表明，光和氧气对叶绿素的降解具有极显著的影响，温度、pH等对叶绿素降解影响也较显著。 1.3.1光 光对叶绿素的降解机理，国内外已有大量的研究。在活体植物中，叶绿素可以得到很好的保护，不仅不会发生降解，还可以进行光合作用。但离体的叶绿素在光的作用下变为三线态，通过电子传递，产生自由基等活性氧而破坏蛋白质、碳水化合物及DNA等生物分子的结构，引起叶绿素分子的降解［9,10］。 研究发现，紫堇叶绿素随着光照时间的增加，其光吸收值降低，同时叶绿素的颜色逐渐变浅，当光照时间大于4h时，紫堇叶绿素在430nm处的光吸收值明显降低。唐小俊等[11]在室外自然光、室内自然光和黑暗条件下对苦瓜叶绿素的光