金属硫蛋白结合汞离子微量滴定量热研究.pdfVIP

金属硫蛋白结合汞离子的微量滴定量热研究 褚德萤·郇宇贺卫国曹炜 北京大学化学与分子工程学院，北京J00871．Fax：0086-10 +联系人E-mail：ehudy@pku．edu．Cl-t 金属硫蛋(MR是言含金属和巯基的一类小蛋白质．哺乳动物的金属硫蛋白含6】个 氨基酸，其中20个为半胱氨酸残基，因而它对d…金属离子具有很强的结合能力，如 C“I)以及Cd、Hg、 Pb等1 Zn(II)、 8种金属【1】．应用x．By衍射[2]和2D．NMR技术 【3】已清楚了解MT的分子结构．因它独特的一级结构，肤链中含三个Cys．x．Y．ch和7个 Cys．X．Cys序列(X，Y是除半胱氨酸以外的其他氨基酸残基)，7个二价金属离子以四面体方 式配位于半胱氨酸的巯基硫，并形成两个结构域．C．瑞由M4S”金属．硫簇组成Or,domain，N． domain．MT的主要生物功能是储存和输运体内必要的微量元素如锌和铜 端由M3s9组成D [4]，对重金属解毒【51，清除体内自由基等[6]．Kaegi曾提出：作为金属离子的给体和受体， MTIapoMT分子对，可能作为一种体内自动调节的金属缓冲系统，在调控体内自由锌离子 浓度方面起关键作用f71．为了揭示MT／apoMT分子对的生物功能机理，育必要分别研究 Zn 7MT和apoMT与金属离子的反应性质． 汞是公认的剧毒物质，并且是一种常见的环境污染物．其毒性可S}主要来源于它和体 内某些敏感的器官及酶系统结合．汞能够取代MT分子中的zn从而抻制其活性．本文作者 铅、镉反应复杂的多． 体系的pH值及录对MT的摩尔比决定其构象和配位方式．MT对 汞的结合数可太于7，在某些条件下甚至可达到20．本文首次用恒温滴定量热计(ITC)(CSC ModeI Sciences 4200．CalorimetryCorp．)研究兔肝金属硫蛋自(MT)与二价汞离子的结台性 MT 2与Hg(II)离子的取代作用(见图1)和pH2．01条件下脱金属 质．测定pH7．41条件下Zn7 硫蛋(apoMT2)Hg(II)离子重组反应(见图2)的热力学参数．分别测定反应物和产物的圆 二色(CD)谱来鉴别体系中的物种． ，‘ 关涟诃：金属硫蛋白 汞辔)i恒温滴定量热；圆二色谱；热力学参数 刍孑＼ jlEFZRENCES j． L 3． Vallee，一AmChem．Soc．79(1957)48I M．Margoshe％B andDStout, A．Collett,N C 2．H．Robbias，D．EMcRee，MWitliamson，S H．Xuong,．F．Furey，BC．Wang 』MoL Biol,，22I(199I)1269 3 Wo Vask． ～％nl“，PschoRze．E r蛸tter．W．Braun，G．Wanger．M H．R andK．WU Khgi thrich，上MotBiot，20l(1988)637 4 Val L Lee．Metho出加劬m口f。毋n205(1991)3 5 Webb．咖m^“a SuppIementum，52(1987)109． 6． Bremner,MethodsinE,,wp,motogy,205(】991)25． on ofall Internalional Meta】lothionein，Dec．8