长庆油田腐蚀性细菌类群探究.pdfVIP

长庆油田腐蚀性细菌类群研究 郭生武陈志昕李平奎 (中油集团套司石油量材研竟所 710065) 马艳玲黄建新 (西北大学生轴幂 710069) 摘要 对长庆油田清水、污水、原油、石蜡、污泥等样品中的腐蚀性细菌进行了分离、计数及韧步鉴定． 结累表明，长庆油田油井中存在5种形态的硫酸盐还原蕾Cs髓)·3种类型的铁鲴蕾(Ⅱ站队及3种类型的jI杆 菌：而且长庆油田油井环境可满足这些徽生物大量生长和繁殖，一旦污染，将造虚臂暂腐蚀与绪垢阻毫． 主置词硫酸盐还原苗(s髓)铁细菌(IB)硫杆菌分商纯化 l前言 造成金属材料腐蚀的主要微生物有细菌、真菌等．尤咀细茁为主，且集中于参与自然 界硗、铁元素循环的细菌，其中以厌氧条件下的硫酸盐还原苗(sRB)和好氧条件下的铁细 菌(IB)及藏杆菌最为突出。 由于这些细菌的存在可以造成油田套管的腐蚀、穿孔及堵塞，严重影响油田的正常生 产【l】，困此有必要对油田中存在的腐蚀性徽生物进行分离鉴定．本工作主要是对长庆油田 不同来源样品中的腐蚀微生物进行了富集培养、系统的分离及初步的鉴定工作，得割了长 庆油田中常见的腐蚀性细菌类群及其数量． 2实验材料和方法 2．1材摹萼 样品采自长庚油田采油二厂101处理站的污水、清水、原油、石蜡(油管内壁)及污泥 (油管内壁)以及长庆油田马岭42井的原油样、原油与水混合样以及中二供水站清水． 2．2培养基啪 2．2．1SRB苗分离、纯化甩培养基 用STK培养基富集培养和分离5RB．其组成成分为：每升蒸馏水中加入q1Pq0．59,N|坼l 一123— 1，Og，Na2s0‘1．Og．CaClf2如o o．1爵M西017也O 2．Og．70％乳酸钠5．o卫1，用Naol{调Pt{为 7-啦7．5，1210C灭菌20rain；临用前每lOOel培养基中加入5Ⅲl已灭菌的1％ FeSO．． (NII．)2s吼·6H20溶液。 向STK培莽基中加入酵母汁以及L—半胱氨酸L-cys)即为STK+L—c粥培养基，可加快SRB 的生长繁殖。 2．2．2IB菌培养基 用柠檬酸铁铵培养基分离IB，其组成成分为：每升蒸馏承中加入(NH．)：s01 0-59-Na’i吨0-她．1(2HP吼0．Gg．tlgso,‘7心O O．59，cacl2‘2H如0．29．柠檬酸铁铵10．09，用NaoH 调PH为7，0．121％灭菌20tin。 2．2．3硗杆菌培养基硫杆菌分离用选择性培养基：脱氮硫耔菌培养基，氧化硫杆菌培养基， 氧化亚铁硫杆菌培养基． 2．3试验方法 、， 2．3．1不同来源样品中腐蚀性细菌数量的测定 ． 用最大可能计数法(肝N)【3】，分别对长庆油田马岭油井42井的清水样、原油与水混台样 中的SRB、IB以及硗杆菌进行数量铡定，并置于30C培养箱内培养． 2．3．2样品的富集培葬及分离纯化 由于样品中茁戤较少-不利于深入研宄，敌对其进行富集培养．富集培养后再进行分离纯 化，直到观察到个体形态和茁落形态—致时，确定为纯种。 3结果与讨论 3．1结果 3．1．1样品中分离的所含腐蚀性细菌的类群及种类 1．1．1 s衄的分葛及依据形蠢初步鉴定结果 对各种不同来源的样品分离的SRB进行革兰氏染色以及单染色，镜检观察菌体形态．结果 表踢SRB为革兰氏阴性菌，且有弧形、短扦欹、s形弯曲、徽弯曲杆状，螺旋形几种形态；但 在来源不同的样品中，各种形态所占优势不同，如表l、表2所示． 表1长庆油田101处理站不