3个Y-STR基因座多态性与其荧光标记复合扩增检测的研究.pdfVIP

萱堕塑适堂 3个Y—STR基因座多态性及其荧光标记 复合扩增检测的研究 朱传红1…，杨庆恩1，：r-HA3，申成群，刘成昌5 3．湖北省公安厅刑警总队，湖北武汉430070；4．河南省公安厅刑事科学技术研究所，河南郑州460010； 5．河南省周口市公安局刑侦支队，河南周口466000) 【摘要】 目的研究Y一染色体STR基因座多态性，建立Y—STR复合扩增及毛细管电泳检测单倍型的方法。 方法应用荧光标记引物，建立DYSl9，DYS391，DYS4393个Y—STR基因座复合PCR扩增体系，并应用毛细管电 泳技术检测110名武汉汉族男性无关个体的DYSl9，DYS391，DYS439 DYS439 法在法医学应用中具有重要作用。 【关键词】 法医物证学；Y染色体；STR；单倍型；多态性 Y27H39 武汉市公安局、湖北省公安厅、河南省公安厅和周口 自Reower(1992)…报告第一个Y—STR 市公安局日常检案。 (后被命名为DYSl9)多态性以来，先后有国内外学者 1．2 报道了DYSl9、DYS389I／1I、DYS390、DYS391、DNA提取 按参考文献[6—8]提取血痕、精斑、组织、 DYS392、DYS393等26个Y—STR基因座多态性口。J， DNA病理切片等DNA。 但多采用PAGE凝胶电泳及银染法进行Y—STR 1．3 分型。笔者采用荧光染料6一FAN、HEX标记引物， PCR复合扩增的建立 1．3．1 引物 建立DYSl9、DYS391、DYS439等3个STR基因座荧 光复合PCR扩增检测方法，获得了武汉汉族男性群体 的基因频率数据，并对3个Y—STR基因座复合扩增 基因座5’端挂HEX；DYS439基因座57端挂6一FAM。 体系的法医学应用价值进行了评估。 引物由上海生物工程公司合成。 1．3．2 PCR扩增体系复合扩增体系：10出 1材料和方法 1．1样品 trmol／L、0．15 panol／L、0．25 tzmol／L)。反应条件： 110名无亲缘关系健康汉族成年男性EDTA抗凝 血样，由武汉同济医院血库提供。50个家系血液及3 30次循环。60℃30rain。 例三代家系男性血样，选自同济医学院法医学系受理 1．3．3PCR扩增产物的检测 亲子鉴定案例，均已证实为亲生关系的真三联。鸡、 新Matrix 鸭、猪、狗、兔、牛6种常见动物血样各6份，取自 ROX组合成的四色标准荧光标记系统。创建方法 集贸市场。石蜡胃组织切片样品7份(保存15个月 1份、9个月3份、3个月2份、1个月1份，来自4色，NED为黑色，ROX为红色。 例医疗纠纷案件。按将男性女性血样按1：1，1：2．5， 毛细管电泳 方法见参考文献[11]。用新建 Matrix 1：5，1：10，1：25，1：50，1：100，1：200，1：300体file对检测结果进行识别，并用Genesean