SARS防治中药抗炎机理地研究--对猪cAMP-磷酸二酯酶活性的影响.pdfVIP

2005学术年会 SARS防治中药抗炎机理的研究 ——对猪cAMP一磷酸二酯酶活性的影响+ 姜代勋1，陈 武2料，许剑琴1，谷金妮1，于同泉3，路苹3，杨柳3，穆祥2 1．中国农业大学动物医学院，北京，100094；2．北京农学院申兽医中心，北京，102206； 3．北京市农业应用新技术重点实验室，北京，102206 学和兽医临床揭示中药防治病毒性炎症的机理和方剂的科学配伍积累资料。方法：以cAMP为底物，经猪嗜中性粒细 胞磷酸二酯酶与《非典型肺炎中医药防治技术方案(试行)》公布药物分别反应，以HPI．C法检测底物cAMP含量，计算 药物对酶活性的抑制率。结果：在6个处方中，除处方1对PDE抑制作用很小外，其他5个处方的抑制率均在60％以 炎性细胞因子的释放和嗜中性粒细胞的活化，实现防治SARS的目的。 关键词：猪；磷酸二酯酶；中药；SARS Acute 严重急性呼吸综合征(SevereRespiratorv 吸系统炎症为主要病理变化的传染性疾病，曾给人们健康和国家经济、社会生活造成极大危害。抗炎 的炎症变化与嗜中性粒细胞关系密切，cAMP—PDE活性在嗜中性粒细胞以及在炎症和抗炎中具有关 键性作用，中药是否通过抑制其活性发挥抗炎作用有待研究。本文探讨了《非典型肺炎中医药防治技 术方案(试行)》公布的6个处方及其26个单味药在体外对猪嗜中性粒细胞中磷酸二酯酶(PDE)活性 的影响，为揭示中药防治病毒性炎症的机理和方剂的科学配伍积累资料。 1材料和方法 1．1 仪器 B多管离心机(上海安亭科学 心机，HZQ—F160全温度振荡培养箱(太仓市华美生化仪器厂)，LXJ—II 仪器有限公司)，SOCOREX移液器(瑞士)。 1．2试剂 T一500：Pham 司产品)，普聚糖(Dextran 点实验室资助 **通讯作者：陈武，term001chenwu@hotmail。COlltlo 善医部分 方法：NaCl 137，KCl 2．7，Na2HP04 8．8，KH2P04 1．5，pH 1，CaCl2 7．4。50mmol磷酸缓冲液：0．1mol／L MgCl2 1，pH KH2P04与0．1mol／LNa2HP04以3：2(v：v) 140，KCl HEPES和Tris以增强提取过程中对嗜中性粒细胞的保护，mmoL／L)：NaCl 1，CaCl2 5，MgCl2 l，HEPES10，Tris5。 I，NaH2P04 1．3色谱条件 色谱柱采用Diamonsil C18 AUFS，柱温 5ptm，250mm×4．6mm，检测波长为254nm，灵敏度为o．05 6．6)组成，容积 为室温，cAMP测定流速为1．0ml／min。分析流动相由甲醇和50mmol磷酸缓冲液(pH 比为10：90。 1．4中药样品的制备 1．4．1处方来源及组成和功效http：／／www．sina．com．cn 讯国家中医药管理局《非典型肺炎中医药防治技术方案(试行)》： 处方1主要功能：益气化湿，清热解毒。 药物组成：生黄芪109，败酱草159，薏苡仁159，桔梗69，生甘草39。 处方2主