β2-肾上腺素能受体基因多态性和儿童哮喘的关系.pdfVIP

明显差异。原因可能为大部分患儿没有进入青春期，出现复发的病例数少有关。 综上所述，微创漏斗胸矫形术安全有效、长期效果满意，注意患儿有无金属过敏史或选用钛制矫 形板有可能减少排斥反应的发生。 p2一肾上腺素能受体基因多态性与儿童哮喘的关系 张喜英赵文利桂芹何念海 第三军医大学西南医院儿科40(038 支气管哮喘是由多种细胞和细胞组份参与的气道慢性炎症性疾患，为多基因遗传性疾病。喘息 性支气管炎(简称喘支)是婴幼儿常见的呼吸系统疾病，其临床表现与哮喘很相似．其中一部分喘息 性支气管炎婴幼儿反复喘息发作，发展为哮喘。说明两者间可能有某种关联性，甚至有人认为喘支 炎就是哮喘的早期表现。很多学者就二者的关系作了大量研究，但在分子水平上的研究罕见。已证 实人染色体上存在与支气管哮喘有关的多种易感基因，其中很多研究都发现B2一肾上腺素能受体 (晔一Aa)基因多态性与哮喘有关。本研究采用PCR一限制性核酸内切酶分析法，通过对B2一AR 基因16、27位点的多态性的分析，及血浆IgE的检测，从分子水平来研究喘支与儿童哮喘的关联。 1对象和方法 1．1研究对象 《实用儿科学》(第6版)喘支诊断标准。其中男78人，女41人；年龄最大2岁11个月，最小3个月， 平均1岁8个月。均排除先天性疾病引起的喘息，符合喘支炎诊断标准。 1．1．2哮喘组支气管哮喘患者217例均为急性发作期，其中男性135例，女性82例，年龄最大 喘防治常规》中的哮喘诊断标准。 1．1．3对照组随机选取同期50例正常儿童，近期均无呼吸道疾病，无变态反应性疾病及寄生虫 感染史。其中男32例，女18例，年龄最小2岁，最大13岁。 1．2方法 全血基因组DNA提取试剂盒，按照说明操作提取DNA，用分光光度计测DNA的含量和纯度。 TICTIGCTGC,CACCC 1．2．2引物设计及PCR扩增引物上游：5’C．CC CAT3’； CTCGAACTIGC,C ACG CAT 下游：5’CAG 见图1。 1．2．3限制性核酸内切酶消化取8ta扩增液加入缓冲液1．3出，超纯水3．75一，限制性核酸内切 ·104· 酶Ncol或BbvIO25“t共13 3pl体系于37t水浴箱温育，过夜消化，取出酶切产物加2山误酚蓝于 4％的琼脂糖凝胶电棘，电压80V，电泳90rain后观察．据条带鉴定p2AR多态性．见图2，图3。 点的128和146bpONA片段是判断分型结果的关键。 1 2 4用ELISA法检测血浆rgE试剂盒由德国RECI Dza酽n咖sCmbH有限公司提供，操作步骤 参照试剂说明书。 I 3统计学分析所有数据采ⅢSPSSl0 0统计软件分析。先计算各组该位点基因型分布频率及 等位基因频率，组间频率比较用卡方检验。备型间的I凹均值用±s来表示，偏态资料采用麸和柱验 进行分析。 2结果 2 1p2一AR基凼16位点多态性在健康组、喘支组及哮喘组中的分布 艮～AR基因16位点多惫性的分布频宰，在三组均以杂合子比率较高，精氨酸纯合子比率居 中，甘氩酸型纯台子比率较小。各基因型频率及精氨酸、甘氪酸等位基因频率三组比较均无统计学 意义(P005)(见表1)。(略) 2 282AR基因27位点多怠性在健康组、喘支组及哮喘组中的分布 27位点多态性的分布频率在各组以杂合子比率较高，但谷氨酸／各氨酸基因型频率在哮喘组明 显低于对照组(x2=6 063，P(0 05)，喘支组与对照组无统计学差异．与哮喘组也无统计学差异(r =2 346，1557，P)o 05)。哮喘组备氨酸等位基因频率明显低于对照组，谷氪酰胺等位基因频率 高于对照组(r=4 922，P005)。(见表2)(略) 23各位点基因多态性与血浆I画关系 哮喘组艮