丹参种质的亲缘关系和主要成分含量相关性初步研究.pdfVIP

湖南中医药大学学报 2007年8月第27卷 V01．27s1 ofTCMUniv．ofHunan Aug．20ff7 222 Journal 丹参种质的亲缘关系与主要成分含量 相关性初步研究 王春丽”，梁宗锁p，李殿荣2。王灏2 (1．西北农林科技大学生命科学学院，陕西杨凌712100；2．陕西省杂交油菜研究中心，陕西大荔715105) [摘要】丹参是一种重要的传统中药材，本研究选择我国丹参主产区10个居群的丹参，筛选引物进行 RAPD—PCR扩增并对结果进行聚类分析，得到根据遗传距离和相似性系数的两种聚类树状图，四倍体是陕西商 洛丹参染色体加倍诱变体。根据遗传距离的聚类图中这二者遗传距离很近，可见根据遗传距离的聚类结果更接近 实际掌握的亲缘关系。同时采用高效液相色谱法测定丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量。发现遗传距离较近的居群，其 在道地产区的丹参酮HA舍量也近似；且从道地产区移栽到引种地后，丹参酮IIA含量一般会下降。从遗传学上 说明了植物合成丹参酮的能力是长期适应环境、自然选择、演化而成，受遗传控制。同时受植物生长状态、碳源供 应等影响。因而可根据道地产区和非道地产区丹参酮HA含量的差异，初步判断丹参对非道地产区环境气候的适 应程度。本研究中，安徽毫州丹参和北京丹参丹参酮IIA含量测定值与道地产区相差较小，可见这两个居群对引 种地环境气候较适应。 [关键词】丹参；聚类树状图；丹参酮HA；适应性 [中图分类号】 (文献标识码】 · [文章编号)1000-5633(2007)S1-0222-05 丹参属唇型科(Labiame)、鼠尾草属(Salvia样品进行RAPD—PCR扩增，根据扩增产物对其遗传 Linn)植物，以其根及根茎人药，其药材名为丹参关系进行聚类分析；并采用高效液相色谱法测定主 SAIⅣIAE (Danshen，RADIXMILTIORRHIZAE)，要药物成分丹参酮IIA和丹酚酸B的含量，分析丹 具有“祛瘀止痛，活血通经，清心除烦”等功效，临床 参药物成分与其亲缘关系的内在联系；根据在道地 上是治疗心、脑血管疾病的首选药物。其主要药物成 产区和引种地主要药物成分含量的变化，就其对环 分可分成两类，即脂溶性二萜醌类(丹参酮类)和水 境的适应性进行评价。 溶性的酚酸类化合物。另外，丹参中还含有黄酮类、 1材料和方法 三萜类和甾醇等成分。丹参的需求及使用量一直在 不断迅速扩大，70年代中期丹参药材已经供不应 1．1实验材料与试剂 求，我国丹参植物资源非常丰富，但长期处于野生状 实验材料列于表1。 态，滥采滥挖，致使一些优良品种不能得到很好利用 从表1所列地方随机采挖分株繁殖的丹参小 或频临灭绝，所以运用现代科技对其进行研究、整 苗，于3月下旬栽于陕西省杂交油菜研究中心试验 理、开发十分必要。 田，每个居群随机选择20株，每株采摘一片幼嫩叶 片，剪碎混匀，取混和样提取DNA。移栽当年的11 -DNA标记是DNA序列信息的直接反映，可为 系统地研究丹参种质资源提供大量可靠的信息数 月底，采挖地下根，液相色谱法测定单株丹参酮Ⅱ 据；药典规定以丹参酮IIA(％)为丹参药材质量的衡A、丹酚酸B的含量，求平均值。 量指标【1】。本研究根据丹参主产区，选择了四川中江， 实验所用引物及主要试剂购于上海生物工程技术有 陕西商洛、山东、北京、江