糖尿病溃疡创面血管化程度与其促血管化生长因子表达变化.pdfVIP

众所周知，TGF-β1 是引起纤维化的最重要的细胞因子之一。研究表明，创面内成纤维细胞的 TGF-β1 自分泌现象是导致瘢痕增生的一个重要环节。TGF-β1 能激活成纤维细胞分化成为肌成纤维 细胞，TGF-β1 刺激细胞的信号转导通路已研究清楚，其造成纤维化的机理已有相当多的文献讨论。 肌成纤维细胞分泌的 TGF-β1 含量高于正常成纤维细胞，其目的是维持平滑肌肌动蛋白的特性，促 进成纤维细胞转化为肌成纤维细胞。本实验中测定的肌成纤维细胞分泌的 TGF-β1 含量显著高于成 纤维细胞，与众多有关纤维化的文献相一致。 Doris Greiling 等发现：从纤维蛋白凝胶或胶原凝胶中去除FN 则迁移的细胞显著地降低，提示 FN 为细胞迁移的诱导剂。细胞的运动在体外模型中可被RGD 肽段或α5β1 和αvβ3 整合素受体的亚 基抗体所抑制，而这两种整合素正是与FN 相结合的整合素。在肝脏、肾脏硬化的过程中，FN 的表 达都明显增加，瘢痕肉芽组织中 FN 也显著增加，这可能是有利于细胞的迁移，文献显示：细胞在 FN 基质上的贴壁粘附和迁移能力高于其他的基质，FN 有助于成纤维细胞转化为肌成纤维细胞。FN 的细胞片段（FN-ED-A ）还是反映TGF-β1 活性的 ECM 成分。本实验显示肌成纤维细胞分泌的的 FN 显著高于成纤维细胞，表明在瘢痕产生和维持过程中，FN 增高。这有助于细胞的迁移，有助于 创面的愈合，有助于成纤维细胞转化为肌成纤维细胞。 综上所述，增生性瘢痕皮肤组织的ECM 结构和成分、含量都较正常皮肤则组织有所改变，在这 一过程中，具有收缩特性的成纤维细胞-肌成纤维细胞起了主要作用。究其原因，我们认为，增生性 瘢痕是创伤修复过程的延续。从创伤修复到增生性瘢痕整个过程中，主要的事件是成纤维细胞转化 为肌成纤维细胞，转化成功的肌成纤维细胞获得了几种重要的能力：1. 强大的收缩能力；2. 一定的 侵袭能力；3. 分泌大量的胶原和 FN 等和瘢痕密切相关的 ECM 以及许多生物活性物质的能力，这 些能力的增加可以解释瘢痕不断增生的原因。 糖尿病溃疡创面血管化程度及其促血管化生长因子表达变化 林 才 乔 亮 张 鹏 徐建军 陈更新 杨 宁 陆树良 温州医学院附属第一医院烧伤科 上海第二医科大学附属瑞金医院烧伤科 糖尿病溃疡是长期糖尿病患者主要的并发症之一，不仅给患者带来很多痛苦，而且治疗上也非 常棘手。糖尿病溃疡难愈发生机制研究正成为研究重点。新生血管形成在溃疡修复中起重要作用。 组成新生血管的内皮细胞也是创面愈合中主要的修复细胞之一。内皮细胞趋化、活化、迁移、增殖 和分化等功能对新生血管的形成具有重要作用；同时血管内皮细胞亦分泌生长因子、细胞外基质和 蛋白酶，参与创面愈合的调控、基质的形成和降解等过程。然而针对糖尿病溃疡创面中血管化和调 控血管生长的细胞因子研究的报导不多，高糖环境对溃疡创面愈合过程，特别是内皮细胞功能及其 = 102 = 血管化过程影响的了解甚少，因此，本研究旨在通过对糖尿病患者溃疡和非糖尿病患者创面中血管 化程度和促血管化生长因子表达的差异性研究，研究糖尿病条件下创面愈合过程中血管化和相关促 血管生长因子的变化规律，为进一步深入探讨糖尿病合并创面难愈的机制打下基础。 材料和方法 1 ．选择需手术治疗的糖尿病足部溃疡患者12 例作为实验组，按世界卫生组织1998 年标准确诊 符合糖尿病II 型诊断。同时对手术治疗烧伤患者12 例未作对照组。两组患者均无其他严重并发症， 并且都签有知情同意书。 2 ．取材：糖尿病足部溃疡创面取材，溃疡包含创缘切取1×1cm 大小组织块两块，一块置于4% 中性福尔马林，另一块作组织块培养待测。 3 ．组织培养：所获创面组织标本参照Garner 等的方法，以1cm×1cm 的消毒不锈钢片为模板， 剪取同样大小的组织块标本，经 Earles’s 液充分洗涤，除去血块和皮下脂肪组织，迅速置于含 MCDB110 培养液3ml 的培养瓶中，在37℃、5%CO2 培养箱中培养16 小时，使组织充分释放生长因 子至培养液中，终止培养，吸取培养液，高速离心，500g×5 分钟，取上清分装，置-70℃保存待测。 4 ．FGF-2 蛋白质水平测定： 采用ELISA 技术测定组织块培养液中FGF-2 的含量，