特异性转录因子诱导体细胞重编程为多能细胞的研究进展.pdfVIP

巾I司备牧兽医学会动物繁殖学分会第十l『【l届学术研讨会论文集 特异性转录因子诱导体细胞重编程为多能细胞研究进展 邓彦飞，刘庆友，石德顾‘ 广西大学动物繁殖研究所，广西南宁530005 摘要已分化的体细胞通过核移植，能重编程为具有多能性的干细胞，但通过这种方法获得人类多能胚胎干细胞涉及早期胚胎 损伤的伦理学争议。近年来，研究人员对采用其他方法重编程体细胞获得多能干细胞进行探索性的研究，从而避开伦理学问题， Lin28导入分化的体细胞，成功的将小鼠和人类的体细胞重编程为诱导多能细胞(inducedpluripotentstem，iPS)，显示出该研 究领域的广阔前景。本文拟对体细胞重编程的研究进展进行综述，重点介绍特异性转录因子诱导体细胞成多能干细胞的研究进 展，以期为该领域的进一步探索提供借鉴。 关键词体细胞，转录因子，重编程，iPS细胞 多能性细胞是指在一定的条件下，既可以维持不分化而无限增殖，又能分化为各种类型细胞和组织的一类细 胞。多细胞生物的绝大部分细胞。处于高度分化状态，细胞的分化潜能随着分化程度的提高而逐步丧失。细胞的定向 分化最早开始于早期胚胎的2细胞和4细胞阶段，受精卵卵裂球已经开始有选择的发育成具有多能性的内细胞团 和滋养外胚层的能力【lJ。在体内，多能性细胞仅存在于早期胚胎短暂的细胞阶段，包括囊胚期的内细胞团(ICM)，这 s毫em 种来至内细胞团的胚胎干细胞(emb呵o 促进增殖和抑制分化的因子，其多能性可以得到维持，并始终保持未分化状态，这就是ES细胞具有的特异性的自我 更新能力【习。 多能干细胞分化为特异的细胞系过程中，会伴随着一系列基因表达和表观遗传上的变化n4】。曾经很长一段时 间，人们不能确定已经分化的成年体细胞能否完全逆转其遗传和表观遗传上的变化，重新获得多能性。第一例体细 cell 胞核移植(somatic 制能够使分化的体细胞核发生重编程重新获得细胞的多能性陶。但是，利用体细胞核移植的方法生产某种病人特异 stem 性干细胞(nuclear仃ans^玎embryo 异常等影响。与此同时，核移植中所用到的人类卵母细胞，以及对卵母细胞和早期胚胎进行操作存在和伦理和法律 上的问题，成为ntESC用于人类疾病细胞治疗的障碍【6】。本文主要介绍了除核移植外，其他一些生产多能干细胞的方 法，其中又晕点介绍转入特异性细胞转录因子诱导体细胞转化成干细胞的研究进展用。 l体细胞重编程的方法 1．1细胞融合 目前已经证明，用多能干细胞与已经分化的体细胞融合杂交，可以使小鼠和人类的体细胞发生重编程为多能性 细胞。这些重编程的多能细胞能够重新表达一些与多能性相关的标志性基因隅91。尽管如此，用这种方法产生的多能 性细胞常常具有两套染色体，这样就限制了其在临床医学上的应用。如果在细胞融合之前除去ES细胞的细胞核，就 不会使杂合的细胞保留两套染色体，但这种方法会除掉保留在细胞质中的能够重新活化杂合细胞爹能性标志基因 表达的一些冈子，使得杂合细胞不能完全重编程唧。从理论上讲，可以通过对具有两套染色体的正常杂合细胞进行挑 选，或将多余的染色体除去，但在实际操作中却难以实施【101。 1．2用干细胞提取物培养分化的体细胞 直接将人类的体细胞与爪蟾卵母细胞提取物…】、胚胎生殖细胞提取物【l习、畸胎瘤细胞提取物或者胚胎干细胞提 取物共培养【13】，可以使部分体细胞重编程逆转成为多能干细胞，使多能性细胞的标记基冈表达。有学者质疑用这种方 法能使多能性细胞的标志基因(如Oc“等)重新表达，但这些基因的来源可能是残留在体细胞表面的干细胞提取物 【1．1。Taranger等【i3】发现，荤编程的HEK293T细胞的确具有分化为多种细胞细胞系的潜能。 13特异性细胞转录因子诱导体细胞发生多能性重编程及其研究进展 转染维持干细胞多能性相关的特异性转录因子进入体细胞，从而对体细胞进行莺编程也是生产干细胞样多能 stem 性细胞的方法之一，研究人员称之为诱导多能干细胞(iIlducedpl嘶叫entcell，iPs)用。目前已经证明，这种方法 能使小鼠和人的体细胞蓖编程为多能干细胞№阍。 1．3．1人类和小鼠iPs细胞的产生 2006年日本京都大学Shinya 鼠的成纤维体细胞，获得了iP