淋病奈瑟菌抗生素耐药遗传学探究.pdfVIP

， 几种检测解脲脲原体方法的平行比较研究 王荷英施荑琴叶颇章王红春 中国医学科学院中国协和医科大学皮肤病研究所；中国CDC性病麻风病防治技术指导中心 摘要解脲脲原体(UreaplasmaUrealyitcum．Uu)是人类泌尿生殖道中支原体感染的主要 病原体之一，能引起典型或不典型的尿道炎等疾病的临床症状，且具有性传播性。为使病人 得到及时防治，寻找快速、简便、特异性和敏感性高的检测支原体方法十分必要。传统的“二 步法”即取样后先接种液体培养基，再用其阳性培养物接种到固体培养基上，观察是否有支 原体特征性油煎蛋样集落生成再确定诊断。但此过程比较繁琐，尤其在固体培养基上的支原 体集落，若不是熟练的技术人员在显微镜下较难观察确切。聚合酶链反应(PCR)法虽较快 速、准确，但在多数情况下需集中多量标本去完成操作。本研究共计采集性传播疾病(STD) 患者尿道(宫颈)分泌物标本617份，经接种液体、固体培养基以及用同一标本作套式 PC(Nested PCR)检测，对3种不同来源的Uu液体培养基(高效培养基和上海培养基甲、乙) 的Uu阳性率及其生长速度作了平行比较，以及对Uu液体、固体培养基的检测和高效液体培 暮基与套式PCR的检测效果作了全面的评价。 实验结果表明，高效uu液体培养基优于其他2种液体培养基，经统计学处理表明，显 示有非常显著性差异(PO．Ol—PO．0001)。高效Uu液体培养基与固体培养基之间以及高效 uu液体培养基与套式PCR法检测间，均无显著性差异(PO．05)，提示液体培养基检测支原 体可以替代其他方法检测。但以上实验中也表明，液体培养基中的质量是检测中的关键。优 质的液体培养基具有简易、快捷、价廉、培养基易保存以及实验稳定性好等优点，适宜于广 大基层单位使用。本研究对支原体的临床检测工作有重要的实践意义。 荚键词解脲脲原体；聚合酶链反应；支原体培养 淋病奈瑟菌抗生素耐药遗传学研究 糜祖煌黄瑞萍郑亚芬 摘要目的：探讨淋菌临床分离株抗生素耐药遗传学背景。方法：对分离自常州地区的 42株淋菌进行青霉素、四环素、环丙涉星、大观霉素纸片法药敏试验以及相关耐药基因 基因(73．8％)，经测序均为TEM-1型，与周伟琳等从大肠埃希菌中检出的TEM一1序列完全 一致“。另5例青霉素耐药但TEM基因阴性，对其penA基因测序发现与Brannigan等报道的 青霉素敏感株penA序列相比均存在第345位氨基酸密码子CGA插入，而与他报道的青霉素 耐药株序列(美国国立生物信息中心登录号分别为X54021、X54022)完全相同。两者合计 作者单位：214026无锝．无锝市克鹰遗传技术蹴所(麋祖煌)；常州市妇幼撂健院(黄瑞萍，郏亚芬 ·466· 丙沙星耐药状况：表型：耐药39株(92．9％)、中介3株(Y．1％)，环两沙星不敏感率100％。 基因型：gyrA基因测得序列与Deguchi等报道环丙沙星敏感的野生型淋菌标准株 霉素耐药状况：表型：耐药1株(2．4％)，敏感41株(97．6％)，不敏感率2．4‰基因型：42 信息中心登录号X07714)相比均没有发现突变存在。结论青霉素、四环素、环丙沙星的 耐药相关基因检测提供了淋菌高耐药的遗传学证据。表型与遗传学均支持大观霉素是淋菌感 染治疗的有效药物。 淋病奈瑟菌(淋菌)临床分离株的青霉素、四环素、环丙沙星耐药率逐年上升，仅大观霉素的耐 药率仍在较低水平”。1。多年来，我国淋菌临床分离株耐药的遗传学背景研究侧重于细菌的质粒谱分 析”2，而耐药相关基因的直接研究较少甚至缺如。为深入了解淋菌临床分离株的生物学特性和指导 临床用药，我们对分离自常州地区的42株淋菌进行了与青霉素耐药相关的8内酰胺酶TEM基因、青 霉素结合蛋白2编码序列penA基因、与四环素耐药相关的核糖体保护蛋白编码序列tetM基因、与环 等5种主要耐药基因检测与分析，现报告如下。 1材料与方法 1．1材井 检奁、氧化酶试验、糖发酵试验和淋菌种特异cppB基因PCR检测证实。青霉素、四环素、环丙沙星 和大观霉素敏感试验采用纸片扩散法，并按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准操作与判读 结果。 1．2方法 1．2．1研究策略 TEM基因、te