精浆中前列腺特异抗原和纤维连接蛋白相关性的研究.pdfVIP

-553· 精浆中前列腺特异抗原与纤维连接蛋白相关性的研究 高杨刘延红夏洪印孟凡伟 目前男性不育症中精液液化延迟者的比例增加。尽管部 在20--40。；避免用普通的乳胶避孕套和塑料容器采精。 分精液液化延迟患者仍有其他病因导致不育，但进一步理解 4．将精液全部射人容器内，保证精液标本采集完整。 精液液化过程中的作用机制，还是很有必要的。在此，我们选 5．标本瓶上贴好标签，化验单上注明姓名、年龄、日期、采 择了30例60分钟精液正常液化及47例不液化者，对其浆中精时间。 前列腺特异抗原及纤维连接蛋白的含量进行了测定。 (二)送检后利用清华同方精子、微生物动(静)态图像分 材料与方法 析系统4．0版行精液常检查。采取形态学方法测定，精液粘 一、实验分组： 液丝的出现为判断未完全液化的征象。利用玻璃棒插入精液 中，提起玻璃棒时如果有粘液丝出现，长度大于2cm，为精液 1．A组：60分钟内液化组，30名正常男性，年龄25～35 岁。均为有生育力的男性，其妻于近12年内妊娠或分娩者。 液化延迟。60分钟内不液化精液标本于60分钟后进行精液 精液常规检查在正常范围。 常规检查。 2．B组：60分钟内不液化组，47名不育患者，为婚后1～3 年内夫妻同居、无避孕、有规律及满意的性生活而女方没有获 取上清，一80度冰冻保存。 得妊娠为标准，女方查体无异常。年龄24--38岁。 (四)测定精浆PSA含量：冰冻标本溶解后，取标本100u1 液化时间的判断：采取形态学方法测定，精液粘液丝的出 J 现为判断未完全液化的征象。利用玻璃棒插入精液中，提起 次至10000倍。稀释后的标本利用AIAC时间分辨荧光分 玻璃棒时如果有粘液丝出现，长度大于2锄为精液液化延 析仪自动分别测定各标本PSA的含量。 迟。 (五)酶联免疫法检测定FN含量： 二、主要试刘、药品及仪器 1．试剂重建： (一)试剂及药品 浓稀释液用前置于37。C水浴15分钟，然后用蒸馏水做 1．纤维结合蛋白含量测定试剂合，上海大阳生物技术公 10倍稀释。 司，批号：mb0401 浓洗涤液用前置于37。C水浴15分钟，然后用蒸馏水做 2．Free 20倍稀释。 PSA、Total PSA试剂合，芬兰wAI．IAc公司，批 号：211265 3．1％胎牛血清蛋白缓冲液，山东大学西校区生化教研室 (二)仪器 32、16、8ng／ml七个标准点。 1．WAI 2．加样：每孔加不同浓度标准品或冰冻本溶解后取标本 LAC时间分辨荧光分析仪 荷兰wAI．IAC公司 2．酶联免疫检测仪D(瑚22A型。华东电子仪器厂 3．洗涤：弃去反应孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置3 3．)唧一)80A漩涡混合器 秒钟，甩干，反复三次后拍干。 上海精科实业有限公司 钟。 4．加样器 5．洗涤：弃去反应孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置3 5．低速自动平衡型u=z4—0．8离心机 秒钟，甩干，反复三次后拍干。 北京医用离心机厂