几种生防细菌在生物防治上的应用.pdfVIP

首届全国高山蔬菜研讨舍论文集 83 几种生防细菌在生物防治上的应用 王攀杨自文王开梅胡洪涛， (湖北省农科院湖北生物农药工程中心湖北武汉430064) 摘要；从作物根际土壤中分离到的细菌中，筛选出4个具有较强拮抗活·|生的菌株。室内测定对水稻纹枯病首、瓜果腐 霉，油幕茵核病茵、棉花枯萎病菌、棉花黄萎病茵、番茄青枯病茵等重要土传病原茵有较强桔抗作用。 关键词：土侍病害生物防治拮抗细菌 植物土传病害是由土传病原物(真菌，细菌．线虫、病毒)引起的植物病害，通常侵染植物根部，引 起植物根部乃至全株的病害，造成重大的经济损失。多年来，以化学防治为主的措施不但未能遏制土传病 害上升的趋势，而且还抑制了土壤中的有益微生物，导致病原菌产生抗药性，同时造成有害物质残留。植 物根际有益促生细菌不仅在其生长发育中产生多种拮抗性或竞争性的代谢产物，通过直接或间接作用，达 到阻碍或杀死病原菌的效果而且可以促进植物的生长并与植物有较好的亲和性，生防效果持久。寻找生防 菌资源．探索控制士传病害的生物防治途径，对农业可持续发展具有重大意义。本研究从不同植物根际土 壤中分离筛选到4株对番茄青枯病菌、棉花枯萎菌等植物土传病原菌具有较强拮抗作用的菌株。 1材料与方法 1．1供试菌株和培养基 水稻纹枯病菌(Rldzoctoiliasolani)、瓜果腐霉病菌(Pyt碰um (Sclerotinia sclerotiorum)、棉花枯萎病菌(Fusariumoxysporum 萎病菌(Verticillium dahliae)和番茄青枯病菌(Ralstonia 培养基，PDA培养基和SPA培养基n1。 1．2拮抗菌及病原细菌苗悬液的制备 NA 平板上纯化3次后，于4C保存在NA斜面上备用。将拮抗细菌在NA斜面上活化后分刖移入50ml 中，200 r／min、30℃振荡培养48h后得到菌悬液。 1．3拮抗细菌拮抗性能的测定 1．3．1对土传真菌拮抗性能的测定 在PDA平板中央放置病原真菌菌丝块(西=10mm)，呈对角线放置4个消毒过的牛津杯(西= 9mm)，吸取拮抗细菌培养液200¨l于牛津杯中。设无拮抗细菌处理为对照，每处理重复3次。25～ 28℃培养，待对照真菌长满平板后测定抑菌圈…。 1．3．2对土传细菌拮抗性能的测定 吸取番茄青枯病菌培养液0．1ml均匀涂布于NA平板上，放置30min，待表面干燥后呈对角线移入4 个直径为9mm的牛津杯，分别吸取200”l拮抗细菌培养液接于牛津杯中， 每处理重复3次。35℃培养24～48h后测定抑菌圈。 1．4拈抗细菌代谢产物拮抗性能测定 将拮抗细菌培养液离心后取上清，经细菌过滤器(直径0．22um)除去菌体即为代谤|产物。测定方法 同1．3。 2结果与分析 2．1拮抗细菌拮抗性能测定 从土壤中分离到的拮抗细菌对6种病原菌有不同的拮抗作用。表l显示这4种拮抗菌对不同病原菌的抑菌 圈直径(mm)。从表1结果分析，这4种茵除了对瓜果腐霉病菌未表现出拮抗活性外，对其他几种病原菌或 多或少的表现出拮抗括性。其中拮抗菌Y和B．s的拮抗谱较宽，对水稻纹枯病菌，油菜菌核病菌，棉花枯 萎病菌和棉花黄萎病菌都有拮抗活性。但是能对番茄青枯病菌产生高拮抗的细菌不多。 84 首届全国高山蔬菜研讨会论文集 表l ＼＼ 水稻纹枯病菌 瓜果腐霉病菌 油菜菌桉病苗 棉花枯萎病菌 棉花黄蒌病菌 番茄青枯病菌 2．42 17．4l Y 7．01 6．60 5．23 3．50 B．s 8．22 4．23 6．80 0．80 049l 8．70 690 2．2拮抗细菌不同时间发酵液拮抗活性的测定 表2 0491(系列】)，Y(系列2)，B