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毛细管芯片电泳多孔导电膜进样方法 李晶晶，王亚荣，张玉秀，吴志勇+、，，／ 东北大学分析科学研究中心沈刖110004 直接利州毛细管电泳中常用的石英毛细管建立的芯片屯浊是一个嚣翁在背通实验室中 进行的棼片电泳方法C1]。If英毛鲴管光学透明的特点为在嚣片匕进行光应检测及荧光检测 提供了便利。对丁此类芯片，由于通道结构简单，因此难以利剧微加[方法形成的十字结构 或疆T结构进行进样操作。利用流动注射及落滴等方法为该类芯片电泳的进样提供了解决方 案[2]。利用化学刻蚀方法可以在砸英毛细管上形成导电的膜，小的离子分子可以自由通过． 同时对虹吸有一定的抑制作用。我们对刻蚀的条件进行了研究，并已经在毛细营电泳中实现 了蛋白的数卣倍的浓缩效率[3]。本文介绍利用刻蚀得到的多孔导电膜进彳亍电进样方法，初 步用荧光显微镜测定电渗流的方法对其可行性进行了验证。 试验部分 仪器技术有限公司)，所用熔融石英毛细管(河北永年锐沣色谱器件有限公司)。 新毛细管依次用去离子水、01MNaOH、去离子水、0IMHCI、去离子水冲洗，在待刻 蚀处烧去聚酰亚睦涂层．将毛细管上烧去聚酰亚胺的部分平铺在载玻片上。将两端用环氧树 脂进行围定。取一内径05cm的圆柱形塑料管，在底郝切出两个蠹径约0．5mm的豁口，然后 将塑料管的两个豁口蒂在平铺在载破片上的毛细管上，用环氧树艏粘紧。将毛细管内充满 观测电流．当电流值突然上升时，迅速用2．5M№0H中I|+刻蚀．并将刻蚀液吸出，换成2酬 NaOH，并将管内都充满NaOH溶液．没泡2h后，埘七离子水冲洗后备用。囝1a为芯片示意 陶，型1b为刻蚀毛细管的显微CCD尉。 A B D C t0J 目1(a)*m管葚片结构”自镕腹镕#显m镜目垃女10×fO 结粜与讨论 pH=80j．在B平兀C两端加电压，罗丹明B在B处进样，电进样r600V，3s)，然后在A、C 两端加电压1000V，并在倒置荧光显微镜r观测D处的荧光变化。从加电压时始计时．直到 在D娃观测到荧光停l}(图2)。罗丹明B在pH=8时接近中性，可作为电渗流标记物。已兜1 B和D之间的距离，^和C之间的氏度，由此可以根据驴丹明在给定电压F的从B运动到D 的时闻计算出电渗流的大小。计掉公式为： 微流控芯片实验室进展 ％=垮 b Ⅲ2(日J丰现■自楚光镕S时(b)*光#质Ⅲ到选检测点时 裹1《**自潜漉春征结粜 宴№法数 i 2 3 f目值 ％镕*度(咖2vls‘)×l—j51 2382．74 2．68 如上方法测定的石英毛细管的电渗淌度与传统毛细管电泳中性标志物方法测定方法的 结果一致，从而成为芯片电泳电渗流的一种表征方法。该实验同时表明，刻蚀形成的多孔膜 不仅可用于生物大分子的进样浓缩，还可成为小分离离子的通道上进样的方法，克服通常芯 片电泳电进样中的溢流等问题。由于置于B中的样品与遴道之间的距离仅有lOum之内，因 此电进样可班很快完成。将该芯片与刻蚀形成的灵活的多通道结构相结台还可将该多孔导电 膜对生物商分子的进样浓缩特性引入毛细管芯片电泳之中，从而成为一种简便易行且功能独 特的的芯片电泳形式。 参考文献： s [”_amgL…1，Analom2001，73：454．5 [2]№期Fx』etal，Analyst．2001．126：孙】 [3]±Ⅱ荤．蛋自肺毛目管屯R在线进样难集与*离．末北★学顸t学位皓2，2007