包涵体表达的黄曲霉毒素氧化酶的复性及性质研究.pdfVIP

包涵体表达的黄曲霉毒素氧化酶的复性及性质研究水 沈奕胡丽莎刘大岭谢春芳姚冬生舞 暨南大学微生物技术研究所 广州510632 Emai l：shenyi．538087奄163．com 目的：黄曲霉毒素Bl(AFBl)是一种具有强致癌性、致畸性和遗传毒性的物 曲霉素氧化酶(rAFO)。rAFO为一新发现的氧化酶，对该酶的结构与功能的研究 具有重要的理论和实践意义。实验室前期的工作成功将黄曲霉毒素氧化酶基因克 隆到含有融合标签MBP的pMAL--C2X载体并在大肠杆菌中进行包涵体表达。本 研究将大肠杆菌包涵体表达的rAFO经尿素变性，用不同的复性条件，以期望获得 高纯的活性的rAFO蛋白，对其结构进行了初步的分析，为进一步对rAFO结构及 功能的深入研究奠定基础。 rAFO，FactorXa酶切融合蛋白MBP 方法：采用亲和层析纯化融合蛋白MBP rAFO，制备高纯的MBP及rAOR蛋白混合液，经尿素变性后，以各种复性缓冲液 进行复性