锌指蛋白185对胶质瘤细胞增殖影响的研究.pdfVIP

天津医药2015年3月第43卷第3期 24 锌指蛋白185对胶质瘤细胞增殖影响的研究 陆斌 ，郑全辉 摘要：目的 探讨锌指蛋白ZNF185在人脑胶质瘤细胞增殖中的作用。方法 标本取自2011年 1月一2O13年 12月于唐山市工人医院就诊，经病理确诊为胶质瘤患者的肿瘤组织，以瘤旁组织作对照。提取不同组织总蛋白， Western-blot检测 ZNF185的表达。提取瘤旁组织总RNA，反转录扩增ZNF185编码序列并克隆至pEGFPC2质粒 ， 构建ZNF185表达载体。采用 Lipofactamine2000将ZNF185表达载体转染人胶质瘤细胞系SF767，以转染pEGFPC2 空载体细胞作为对照。采用流式细胞仪检测细胞周期变化 ；MTr法检测细胞增殖活性。结果 与瘤旁组织相比， ZNF185在人脑胶质瘤组织中表达显著降低(P0。01)；转染ZNF185表达载体的胶质瘤细胞与对照细胞相 比 ZNF185的表达显著增加 (P0．01)；过表达 ZNF185导致 SF767细胞 GO—G1期细胞 比例显著增加 (P0．05)，而 s 期细胞比例减少 (P0．05)。同时，过表达 ZNF185也导致 SF767细胞 的增殖速度显著降低 (P0．05)。结论 ZNF185在人脑胶质瘤细胞中发挥抑制细胞增殖的作用。 关键词 ：神经胶质瘤；细胞周期；细胞增殖；锌指 ；转染；ZNF185 中图分类号 ：R739．41 文献标志码：A DOI：10．3969／j．issn．0253—9896．2015．03．005 Theeffectofzincfingerprotein185ontheproliferationofhumangliomacells LUBin．ZHENGQuanhui TangshanGongrenHospital,Tangshan063000，China；2TangshanKeyLaboratoryforPreclinicalandBasicResearchOn ChronicDisease；SchoolofBasicMedcialScience，HebeiUnitedUniversity CorrspondingAuthor E—m0 ：zhqhdlp@sohu．corn Abstract：objective ToexploretheroleofzincfingerproteinfZNF)185intheproliferationofhumangliomacells． Methods Humangliomatissuesandtumoradjacenttissueswereobtainedfromgliomapatientsdiagnosedpathologicallyin TangshanGongrenHospitalfromJanuary2011toDecember2013．Totalproteinwasextractedrfom differenttissues．The ZNF185expressionwasdetectedbyWestern—blotassay．TotalRNAwasextractedrfomtumoradjacenttissues．ZNF185cod· ingsequencewasobtainedbyRT—PCRandinsertedintopEGFPC2plasmidtoconstructtheZNF185expressionvector．Li· pofactamine2000wasusedtotransfecttheZNF185expressionvectortohumangliomacellSF767．pEGFPC2blankvector transfectedSF767cellswereusedascontro1．Changesofcellcyclewereanalyzedb