大白菜、甘蓝与菜薹初级三体的创建及遗传分析.pdfVIP

园艺学报2009，36(增刊)：1953 Sinica AetaHorticuhurae 大白菜、甘蓝和菜薹初级三体的创建及遗传分析 申书兴，张成合 (河北农业大学园艺学院，河北保定071001) 初级三体是在原二倍体的基础上多了一条染色体的个体，即其中某一同源染色体由原来两条变为 三条，是进行基因定位，染色体物理图谱构建等研究的最佳材料。目前在芸薹属蔬菜作物中，国内外 L 尚没有创建初级三体的研究报道。大白菜[Brassicacampestris (B．oleraceavar．capitataL)和菜薹(B．parachinensesBailey)成套初级三体的创建将为基因定位和 基因组研究提供有效的基础材料，必将极大地推动芸薹属蔬菜遗传育种的深入开展。 筛选采用小孢子植株选育法；甘蓝和菜薹初级三体的筛选采用回交选育法。采用核型分析法鉴定各初 rDNA和5S 级三体的类别。25S rDNA为探针的FISH在初级三体上的染色体定位：探针标记采用 DIG-NickTranslation Mix，染色体制片采用去壁低渗一火焰干燥法。利用大白菜初级三体系，采用初 级三体遗传分析的方法对大白菜的花色基因、2n配子发生基因和雄性不育基因进行染色体定位。 大白菜初级三体系的获得：对四倍体大白菜小孢子培养获得的534个小孢子株系进行了有丝分裂 倍体说明大白菜忍耐染色体数变化的能力较高。对2n+1株系的根尖染色体有丝分裂进行核型分析， 获得了整套大白菜初级三体系(1～10号)。 结球甘蓝初级三体系的获得：取4x×2x授粉后21d左右的幼荚，经表面消毒，剥取胚珠接种于 结球甘蓝初级三体系(1—9号)。 菜薹初级三体系的获得：菜薹的三倍体与二倍体正反交均具有较高的结籽率，其中3x×2x的为 2n+l株系进行核型分析，获得了Tfi-3、Tri-7、Tri-8、Tri-9。 筛选出各初级三体形态学标记，测定各三体的n+1雌配子、雄配子传递率。除大白菜的嘶一10 因不能结籽无法传递后代外，其余各初级三体的额外染色体均能通过雌、雄配子传递给后代，相同三 体的n+1雌配子传递率均高于n+l雄配子传递率，不同三体的传递率存在明显差异，同一初级三体 n+l雌配子传递率与n+l雄配子传递率不存在正相关关系。 利用荧光原位杂交技术，对25SrDNA和5SrDNA在大白菜不同三体上的多态性位点进行了分 析，建立了识别大白菜1～4号、9号和10号染色体的FISH标记。 利用初级三体分析，将大白菜花色基因定位于第8染色体上，2n配子发生基因和雄性不育基因 定位于第4染色体上，筛选出了与2n配子发生基因紧密连锁的分子标记。 关键词：大白菜；甘蓝；菜差；初级三体 中图分类号：S 635 文献标识码：A 634．1；S 文章编号：0513-353X(2009)S-1953-01 收稿日期：2009—09—14