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TYR基因多态性对苏禽乌骨鸡肌肉黑色素含量的影响 李国辉张学余苏一军屠云洁殷建玫 (中国农业科学院家禽研究所，扬州225003) 引言 酪氨酸酶(tyrosinase，TYR)是动物体黑色素细胞中黑色素合成的限速酶，是一个含铜 的氧化还原酶，催化酪氨酸氧化成多巴(dopa)，进一步将多巴氧化成多巴醌(dopaquinone)， 多巴醌经过一系列的生化反应最终合成黑色素。根据哺乳动物有关黑色素性状研究结果表 明，大量的基因在各种水平直接或间接影响黑色素的形成。Kin等研究表明人类的TYR基 因是影响黑色素合成的关键基因，是目前研究黑色素性状的第一候选基因。鸡TYR基因被 定位在l号染色体的长臂4区4带，陈志强等对中国丝毛乌骨鸡TYR基因研究证实该基因 突变主要是点突变，并未引起氨基酸突变。邓学梅等对中国乌骨鸡TYR基因外显子变异情 况进行了分析研究，表明TY R基因在乌骨鸡中具有丰富的变异资源。 材料和方法 以中国农科院家禽研究所国家级地方鸡种基因库的苏禽乌骨鸡为研究素材，随机抽取 120只(公母各半)，12周龄翅静脉采血O．5mL，肝素钠抗凝加裂解液5mL，酚．氯仿抽提法 提取基因组DNA。再取胸肌29，用盐酸降解法提取胸肌中的黑色素。TYR基因引物参考陈 GAGCAAAGGCTTCC3’，产物长度为235bp。引物P2序列为 192bp。引物由上海生工生物工程有限公司合成。PCR-SSCP方法检测鸡TYR基因的多态性， 不同基因型间的黑色素含量比较采用最小二乘法分析各基因型与黑色素含量的关联，分析模 型Yi|萨旷Gi+Ik+Bik+Eiko 结果 两对引物的PCR—SSCP分析发现T豫基因在两个位点都存在三个基因型。结果显示引 生一个CT的单碱基转换突变。Pl位点的AA基因型与苏禽乌骨鸡的黑色素的含量显著相关， 从基因型的个体肌肉黑色素含量显著高于AB型和BB型个体(P0．05)。而P2位点的 CC基因型的个体肌肉黑色素含量高于CD型和DD型个体，但未达到显著水平。TYR基因型 AA和CC在白耳鸡群体中的比例分别为28％和24％。单基因效应分析表明，P1位点对黑色 素含量表现为正的加性效应和负的显性效应，P2位点对黑色素含量也表现为正的加性效应 和负的显性效应。两种基因型AA和CC间的互作效应分析表明两基因间的互作效应不显著 (P0．05)。 讨论 本研究通过分析苏禽乌骨鸡群体TYR基因标记各基因型与黑色素的关联，确定了两个 位点的有利单基因型(AA和CC)，其在白耳鸡群体中的分布比例分别为28％和24％，且两 个位点对肌肉黑色素含量都表现为正的加性效应和负的显性效应，A和C等位基因对黑色 素含量表现为负效应。最d,-乘法分析各基因型与黑色素含量的关联，发现Pl位点的从 基因型个体的黑色素含量与其他两种基因型差异显著，P2位点CC基因型个体的黑色素含 量略高于其他两种基因型，但差异都未达到显著水平(P0．05)。，因此可以参考将AA和 CC基因型作为标记辅助选择，以期进一步改善苏禽乌骨鸡的肉品质。 致谢 简介：李国辉，男，研究实验员，主要从事家禽遗传育种与家禽资源保护研究。E．mail： ．s——a．，．h．．．u．．．i．．2．．．0．．．0．．．8．．．@．．．．,．．1．．6．．．3．．．．．．c．．．o．．．m——。