迟缓爱德华氏菌 铁蛋白 Dps(DNA-binding proteins from starved cells)论文.docVIP

迟缓爱德华氏菌论文：铁相关蛋白Dps对迟缓爱德华氏菌毒力影响的研究 【中文摘要】Dps(DNA-binding proteins from starved cells)属于铁蛋白超家族,是原核生物中特有的一类能结合铁离子、抗氧化损伤和保护DNA的重要功能蛋白。本研究在迟缓爱德华氏菌株TX01中克隆得到了Dps家族的两个基因dps1和dps2。将dps1和dps2基因在大肠杆菌中重组表达后,获得的可溶性蛋白rDps1和rDps2具有DNA结合功能和铁氧化酶活性。为了检测dps1和dps2的功能作用,我们构建了dps1和dps2的单基因缺失突变株TXDps1和TXDps2以及突变菌株TXDps2的dps1基因抑制表达菌株TXDps2RI。与野生型菌株TX01相比,TXDps1和TXDps2的生长没有显著性差异,但TXDps2RI的逆境生长能力降低;TXDps1、TXDps2及TXDps2RI的抗氧化损伤、抗紫外线辐射能力皆明显减弱,但TXDps2RI的减弱程度较TXDps1和TXDps2更显著。毒力分析表明,与野生型菌株TX01以及TXDps1和TXDps2相比,TXDps2RI在牙鲆PBL中的生存复制能力显著降低,对牙鲆组织的感染能力大幅下降。综上所述,本研究证明了Dps1和Dps2具有保... 【英文摘要】DNA-binding protein from starved cells (Dps) is a member of ferritin-like proteins that exhibit properties of nonspecific DNA binding and iron oxidation and storage. In this study, we examined the biological property and function of two Dps proteins, Dps1 and Dps2, from Edwardsiella tarda, an important fish bacterial pathogen. Recombinant Dps1 and Dps2 purified from Escherichia coli were able to mediate iron oxidation and bind DNA. To examine the functional importance of Dps1 and Dps2, three mutant E. tarda... 【关键词】迟缓爱德华氏菌 铁蛋白 Dps(DNA-binding proteins from starved cells) 【英文关键词】Edwardsiella tarda ferritin Dps(DNA-binding proteins from starved cells) 【目录】铁相关蛋白Dps对迟缓爱德华氏菌毒力影响的研究 摘要 4-5 Abstract 5 第一章 前言 9-26 1.1 迟缓爱德华氏菌研究概况 9-15 1.1.1 迟缓爱德华氏菌生物学特征 9 1.1.2 迟缓爱德华氏菌的危害 9-10 1.1.3 迟缓爱德华氏菌致病因子的研究 10-15 1.1.4 迟缓爱德华氏菌病的防治 15 1.2 细菌Dps家族的研究 15-25 1.2.1 Dps蛋白的结构 16-17 1.2.2 Dps蛋白的功能 17-21 1.2.3 Dps蛋白调控 21-24 1.2.4 Dps蛋白与细菌毒性 24-25 1.3 本论文的研究意义及目的 25-26 第二章 迟缓爱德华氏菌Dps1 与Dps2 蛋白序列的生物信息学分析 26-37 2.1 材料和方法 26-33 2.1.1 实验材料 26-28 2.1.2 菌株TX01 基因组DNA的提取 28-29 2.1.3 菌株TX01 Dps家族基因的获得 29-33 2.1.4 序列比对 33 2.2 实验结果 33-35 2.2.1 基因组DNA提取结果 33-34 2.2.2 基因的PCR扩增结果 34 2.2.3 序列比对结果 34-35 2.3 分析与讨论 35-37 第三章 重组蛋白rDps1 与rDps2 的表达纯化和功能分析 37-49 3.1 材料和方法 37-44 3.1.1 实验材料 37-39 3.1.2 Dps1 与Dps2 蛋白的原核表达菌株的构建 39-41 3.1.3 rDps1 与rDps2 蛋白的表达 41-42 3.1.4 rDps1 与rDps2 蛋白的纯化 42-43 3.1.5 rDps1 与rDps2 蛋白的抗氧化活性检测 43 3.1.6 rDps1 与rDps2 蛋白的结合DNA活性检测 43-44 3.