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第 ３７卷 第２期 北京化工大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．３７，Ｎｏ．２ ２０１０年 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｅｍｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ） ２０１０ 固定化脂肪酶催化小桐子毛油合成生物柴油 李俊奎　王　芳　谭天伟　邓　利 （北京化工大学 北京市生物加工过程重点实验室，北京　１０００２９） 摘　要：研究了以石油醚提取的小桐子毛油和甲醇为原料，利用固定化 Ｃａｎｄｉｄａｓｐ．９９－１２５脂肪酶催化反应合成 生物柴油的可行性。考察了几种因素对酶法催化合成脂肪酸甲酯的影响。结果表明以小桐子毛油的质量为基准， 在水含量为 １０％，溶剂量为２ｍＬ／ｇ，脂肪酶量为２０％，温度为４０℃的条件下，３次流加甲醇，１２ｈ后单批最高产率可 达９３％。在此条件下固定化酶连续使用 １４批，产率仍然可保持在７０％以上。 关键词：生物柴油；小桐子毛油；固定化酶 中图分类号：Ｑ８１４９ ［６］ Ｔａｍａｌａｍｐｕｄｉ等 用自制的固定化细胞 Ｒｈｉｚｏ 引　言 ｐｕｓｏｒｙｚａｅ经过 ６０ｈ的反应转化率可以达到 ８０％， 生物柴油是可直接用于石化柴油发动机，环境 Ｎｏｖｏｚｙｍ４３５经过９０ｈ的反应转化率可以达到７６％， ［１］ 两者重复使用５个批次，转化率仍然保持在７０％以 友好的清洁能源 。生物柴油生产过程多采用化 ［７］ 学法生产，但由于工艺复杂、醇消耗量大、产物不易 上。Ｓｈａｈ等 将几种商业酶用于小桐子油的催化， 回收、环境污染大等缺点，使其工业推广受到限制。 研究发现固定化酶 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｃｅｐａｃｉａｌｉｐａｓｅ在 ５０ 为此人们将目光投向用酶法合成生物柴油，主要采 ℃，水含量４％ ～５％的条件下，最高转化率为９８％， 用动植物油脂与甲醇进行转酯化反应合成脂肪酸甲 经过４个批次反应酶活没有明显下降。现有的固定 酯（即生物柴油），酶法合成生物柴油具有条件温 化酶催化小桐子油的寿命较差。 和、醇用量小、无污染物排放等优点，但低碳醇转化 本文利用石油醚萃取工艺得到的小桐子毛油为 率低、酶成本高、酶的寿命短，仍是亟待深入研究和 原料，利用本实验室自制的固定化 Ｃａｎｄｉｄａｓｐ．９９－ ［８］ ［２－４］ １２５脂肪酶 催化甲醇与小桐子毛油反应生成脂肪 解决的问题 。 目前各国生产生物柴油的原料各不相同。美国 酸甲酯（ＦＡＭＥｓ），研究不同条件下反应的转化率， 多以大豆油为主，欧洲以菜籽油为主，东南亚以棕榈 探讨了脂肪酶催化小桐子毛油制备生物柴油的可行 油为主。在我国原料的供应是限制生物柴油发展的 性。 关键因素。小桐子油含有毒素，不能食用，是生产生 １　实验部分 物柴油的良好原料。小桐子油是高酸值的油，用化 ［５］ １１　原料和仪器 学催化法工艺非常复杂。Ｂｅｒｃｈｍａｎｓ等 先用酸做 小桐子，购于广西；石油醚、甲醇，分析纯，北京 催化剂，催化酯化反应，减小酸值，除去催化剂无机