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鲤鱼染色体组型的研究 吕真 (河南科技学院动物科学系， 新乡， 453003) 摘 要：方法：本文采用空气干燥法制备鲤鱼的中期染色体。结果表明：鲤鱼染色体是二倍体，数目为2n=100，核型公式为：2n=22m+24sm+54st.t, 染色体总臂数NF=146。结论：不同产地的鲤鱼核型之间存在差异。 关键词：鲤鱼 染色体 组型 核型（Karyotype））—670g，体长25—32cm。 1.2实验方法 1.2.1肾细胞染色体标本的制备 采用经典的肾细胞法[7]稍加修改制备了鲤鱼的染色体。具体步骤如下：在取样前按3μg/g体重腹腔注射秋水仙素（浓度为0.1%）,3.5小时后剪断鳃丝血管放血10分钟，再处死鱼取头肾放于盛有0.75%生理盐水的培养皿中清洗2—3遍，洗去血渍，尽量剔除干净结缔组织、脂肪组织；再将剩余头肾组织块儿转入研钵中，加入少量生理盐水研磨，取上清液于离心管中离心收集细胞，加入35℃预热的0.05 mol/L KCL,用吸管将细胞团吹均匀，置于电热恒温水温箱中低渗处理35分钟，再离心收集肾细胞，经过三次卡诺氏固定液固定后，制成细胞悬液，冰片滴片，空气干燥，用1：9Giemsa染液染色20分钟，蒸馏水冲洗，晾干，镜检。 1.2.2染色体组型分析 在雌、雄个体中各计数50个分裂中期细胞确定染色体数目。核型分析参数均为三个细胞所测的平均值。从鲤鱼的染色体标本中，随机选取清晰可数的中期分裂相100个以上放大后计算每个分裂相中的染色体数目，再进行染色体数目统计，确定染色体众数和倍性。在油镜下选择5个图象清晰，数目完整，长度适中的中期分裂相拍照，照片放大后，剪下每条染色体，用游标卡尺测量全长，短臂长和长臂长，计算其相对长度和臂比，并依据Levan[8] 1964年所提出的标准确定染色体类型，进行同源染色体配对，并按其长度由大到小，分组剪贴，排列编号，翻拍成片。 2 结果 2.1 鲤鱼的染色体数目 鲤鱼的中期染色体数目统计和分裂相分别见表1和图1。从表1可见,鲤鱼体细胞染色体数目2n=100的细胞有74个,占计数总数的74%,2n100的有13个,占计数总数的13%,2n100的有3个,占计数总数的3%。因此可以确定鲤鱼的二倍体细胞染色体数为2n=100。其它具非众数染色体的细胞,很有可能是由于鲤鱼染色体数目较多,制片过程中少数染色体丢失的结果。 2.2 鲤鱼染色体组型 根据鲤鱼染色体相对长度和着丝点位置的测量结果将鲤鱼的全部染色体配成50对(表2)，按Levan命名法分成3组，其中：具中部着丝点的染色体(m组)11对；亚中部着丝点染色体(sm组)12对；亚端部和端部着丝点染色体(st.t)27对。鲤鱼染色体组型见(图2)。从以上可以得出：鲤鱼的染色体为：2n=100，核型公式为：2n=22m+24sm+54st.t， 染色体总臂数(NF)为146。 表1 鲤鱼染色体计数 Table 1. frequency distribution of diploid chromosome counts in Cyprinus carpio 染色体2n分布数目 合计 Diploid chromosome count Total 78 80 82 90 92 95 98 99 100 102 105 细胞数 2 1 1 4 2 1 3 1 74 2 1 100 number of cell (%) 2 1 1 4 2 1 3 1 74 2 1 100 图1 鲤鱼中期染色体分裂相 Figure 1 Metaphase chromosomes of Cyprinus carpio 图2 鲤鱼染色体组型 Figure 2 Karyotype of Cyprinus carpio 表2 鲤鱼核型分析参数 Table 2 parameters of karyotype of Cyprinus carpio