UPLC法测定水产品中土霉素、四环素和金霉素残留量研究.pdfVIP

2015年 簟 1期 — UPLC法测定水产品中土霉素、四环素和金霉素残留量研究 刘 洋 张 乐 (杭州市农业科学研究院实验中心，浙江 杭州 310024) 摘 要：建立 了超高效液相色谱法快速测定水产品中土霉素、四环素、金霉素的方法。样品经 Na2EDTA-McUvaine缓冲液提取，再用HLB固相苹取小柱浓缩与净化，最后在流动相0．5％甲酸一 乙腈梯度洗脱下进行测定。结果显示，土霉素、四环素和金霉素的方法检出限和线性范围分别为 0．O04mg／kg、0．O04mg／kg、0．008mg／kg和 0．02—0．5 g／mL、0．02~0．5 g／mL、0．08~2．0 g／mL，且线性 范围内的相关系数均大于0．999，加标回收率在 72．8％~102．7％。结论：超高效液相色谱法可用于快速 测定水产品中土霉素、四环素和金霉素的含量，结果准确可靠，重复性好。 关键词：超高效液相色谱 ；固相萃取；土霉素；金霉素；四环素 四环素类抗生素主要包括土霉素、四环素和金 霉素，它是一种快速有效的广谱抑菌剂，高浓度时甚 1 材料与方法 至有杀菌作用 1]。在利益的驱使下，鉴于其经济实用 1．1 仪器与试剂 性 ，在水产养殖领域已经被一些养殖户不合理使用， ACQUITYTM超高效液相色谱仪 (Waters公司)， 且用量往往严重超出国家规定的标准，用来预防和 离心机(Eppendorf5810R)，WatersOasisHLB固相萃 治疗水产品的各类疾病并促进水产品生长，以获得 取小柱 (6ec／500mg／60 1TI)，WatersOasisHLB固相 可观的经济效益[。而报道表明 ]，长期食用含抗 萃取小柱(3ee／6Omg／30 m)，WatersOasisMAX固相 生素的食品将对人们的健康造成极大危害，引起骨 萃 取 小 柱 (3ee／60mg／30 m)，氮 吹仪 (美 国 骼畸形和生长抑制，干扰人体的正常生理机能，影响 Organomation公司)。 儿童和青少年的生长发育，降低人体对致病菌的抵 土霉素 、四环素、金霉素标准品 (购 自Dr． 抗能力，并可造成肝肾损害，引起过敏反应、变态反 Erenstorger公司)；甲醇、乙腈 、甲酸，色谱纯 ；高氯 应、耐药l生等。因此，严格控制四环素类抗生素的使 酸、柠檬酸、乙二胺 四乙酸二钠 、三氟乙酸，分析纯 ； 用量，实施水产品中土霉素、四环素和金霉素的残留 磷酸氢二钠，化学纯；实验用水为去离子水。 检测分析十分重要。 1．2 溶液配制 本文建立了水产品中土霉素、四环素和金霉素 1．2．1 标准储备液 分别准确称取一定量标准物质 的超高效液相色谱分析法，与传统液相色谱法相比， 用乙腈定容至浓度均为 100．0 g／mL；一18~C避光保存。 具有检测灵敏度高、分析时间短、结果准确可靠且重 1．2．2 标准中间液 准确移取土霉素标准储备液 复性好等优点。 5mL、四环素5mL、金霉素20mL，用20％乙腈定容至 作者简介：刘洋(1987一)，女，湖北洪湖人，硕士，助理工程师，从事农产品质量安全检测。 Tel：0571E—mail163．com． 豌国 岛圃国 试验研 究 100mL；一4cC避光保存，有效期 1个月。 相进行试验 ，本文比较 了O．1％甲酸 +乙腈、0．1％甲