化学诱导小鼠肝癌模型中CD133 的动态变化.pdfVIP

肿瘤2012 年8 月第32 卷第8 期　TUM OR Vol. 32, August 2012　　 585 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2012 .08.004 Copyright© 2012 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 化学诱导小鼠肝癌模型中CD133的动态变化 1 2 2 2 唐超莉 ，匡志鹏 ，杨　帆 ，吴继宁 1. 广西医科大学研究生学院，南宁　53002 1；2 . 广西医科大学附属肿瘤医院实验研究部，南宁　53002 1 [摘要]　目的：检测肝癌干细胞标志 CD133 在化学诱导 C57BL/6J 小鼠肝癌过程中各时期的动态变化。方法：通 过化学法 [ 二乙基亚硝胺 （diethylnirtosamine ，DEN ）/ 四氯化碳 （carbon tetrachloride ，CCl4 ）/ 乙醇 ] 诱发 50 只 C57BL/6J 雄性小鼠肝癌，对照组为 45 只正常 C57BL/6J 雄性小鼠。观察小鼠成瘤情况和生长状态，对每 2 周 定期处死小鼠获得的组织标本分别进行病理学切片观察，并采用实时荧光定量 PCR、免疫组织化学法、蛋白质印 迹法和 FCM 法分别检测 CD133 mRNA 和蛋白的表达情况。结果：化学诱导 20 周后，成功诱发出小鼠肝癌。实 时荧光定量 PCR 和 FCM 检测结果显示，第 8 周后诱癌组小鼠肝组织中 CD133 的表达高于正常对照组，差异有 统计学意义 （ P ＜ 0.05 或 P ＜ 0.001 ）；随着诱癌时间的增加，CD133 的表达量呈上升趋势，第 16 周时诱癌组 CD133 的表达明显高于前期诱癌组 （P ＜ 0.001 ）。蛋白质印迹法检测结果显示，诱癌组 CD133 蛋白从第 4 周起 出现弱表达，随着诱癌时间的递增，CD133 蛋 白表达量逐渐增多。免疫组织化学检测结果显示，诱癌组第 8 周 CD133 出现弱阳性，第 16 周出现中等阳性，第 20 周出现强阳性；而正常对照组无表达。结论：肝癌干细胞标志 CD133 参与了肝癌的发生、发展全过程，随着诱癌进展其表达量逐渐增加。 [关键词]　肝肿瘤，实验性；抗原，CD133 ；小鼠，近交C57BL ；化学诱癌 [中图分类号]　R73-35＋4 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2012) 08-0585-07 The dynamic change of CD133 expression in chemical-induced liver carcinogenesis in mice 1 2 2 2 TANG Chao-li , KUANG Zhi-peng , YANG Fan , WU Ji-ning 1. Graduate School of Guangxi Medical University, Nanning 530021, China; 2. Department of Experimental Research, Cancer Hospital, Guangxi Medical University, Nanning 530021, China [A BSTRACT]　Objective: To detect the dynamic change of expression of CD133, a marker of liver cancer stem cell, at different stages of liver carcinogenesis induced by chemicals in C57BL/6J mice. Methods: The tumorigenesis and the growth of chemical (diethylnirto