黄芪原生质体分离技术.pdfVIP

28(3)：411—413 2008年5月 广西．植物Guihaia 黄芪原生质体分离技术 刘 强，张宗申*，丛丽娜*，章凌雪 (大连工业大学生物与食品工程学院，辽宁大连116034) 摘要：以黄芪叶片和愈伤组织为材料，对黄芪原生质体的制备分离技术进行了研究。结果表明：采用黄芪 叶片制备原生质体远远优于黄芪愈伤组织，能够获得大量高活力的原生质体；采用2％纤维素酶+o．5％半纤 维素酶+0．5％果胶酶的混合酶水解12h就能达到较好的分离效果，获得高质量的黄芪原生质体，然后进行 原生质体的培养。 关键词：黄芪；原生质体；愈伤组织；组织培养 中图分类号：Q943文献标识码：A 文章编号：1000-3142(2008)03-0411-03 Isolationof fromthe protoplastAstragalus LIU Li-Na*，ZHANG Qiang，ZHANGZong-Shen*，CONG Ling-Xue BioFood 116034，China) (Collegeof Technology，DalianPolytechnicUniversity，Dalian andcallusofthe membranaceuswereUSedtoexaminetheconditionsfor Abstract：Leaves Astragalus protoplastprep- arationandcultureoftheA．membranaceus．TheresultsshowedthattheIeaf oftheA．membransceu$could segment releasemassiveand withthecallusofthe extractedfromthe species，the vigorousprotoplasts．Compared protoplasts leaf aremoreefficientinthecellfusionandtissueculture．Thetreatmentis2％cellulase，0．5％ segment optimized hemicellulase，and for12h． 0．5％pectinase culture words：Astragalus删lbrarlaceu$；protoplast；callus；tissue Key membranaceus)为多年生豆目前，国内外对植物黄芪原生质体的制备、纯化及融 黄芪(Astragalus 科(Fabaceae)植物，其干燥根为常用滋补中药材，含 合的研究极少，本实验对此进行大量实验并分析影 有活性较强的三萜皂苷、黄酮类、多糖类、氨基酸、微 响黄芪原生质体得率、活力的因素，获得了制备黄芪 量元素以及棕榈酸、羽扇豆醇等(胡海英等，2005)。原生质体的理想条件与参数，为进一步利用植物细 但由于草原荒漠化以及乱采挖等原因，药用野生黄 胞融合技术改良和生产黄芪提供理论基础。 芪资源已十分贫乏，即使采用人工栽培的方法不仅 产量不能满足市场需求，而且品质也得不到保证(郑 1 材料与方法 志仁等，1998)。因此，利用现代生物技术提高种质 资源生物量、优化