1核酸的结构及功能.pptVIP

核酸的分子结构、性质和功能 DNA的结构与功能 RNA的结构与功能 mRNA 是蛋白质合成的直接模板，将细胞核内DNA的碱基顺序按互补配对原则，抄录并转送到胞质的核糖体，用以决定蛋白质合成的氨基酸序列 核内不均一RNA(heterogeneous nuclear RNA, hnRNA)：真核生物mRNA的原始转录物是分子量极大的前体，在核内加工过程中形成分子大小不等的中间产物，被称为hnRNA 开放阅读框（open reading frame, ORF）：mRNA分子上从起始密码（AUG）开始到终止密码子结束这一段连续的核苷酸序列，即mRNA分子上的编码区。是一个特定蛋白质多肽链的编码序列 tRNA 含有稀有碱基 3‘末端含有CCA序列 二级结构呈三叶草形 三级结构呈倒L型 蛋白质生物合成中识别密码子，特异性搬运氨基酸的作用 rRNA 其他小分子RNA 核小RNA和胞浆小RNA（snRNA/scRNA） snRNA—核内、与蛋白质结合在一起形成小分子核内蛋白颗粒，参与mRNA的剪切加工 scRNA—蛋白质定位于内质网的信号肽识别 粒子的组成成分 起始RNA—作为DNA生物合成的通用引物 指导RNA —RNA编辑的模板 其他小分子RNA 端粒酶RNA和核酶 端粒：短而数目精确的串联重复DNA小片段与蛋白质够成的特殊结构 端粒酶(telomerase):自身携带RNA模板的逆转录酶，催化端粒DNA合成 端粒酶RNA：形成端粒重复序列的模板RNA 核酸的分子杂交 DNA的变性(Denaturation) ：维持双螺旋稳定性的氢键和疏水键的断裂，DNA分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象。 断裂可以是部分的或全部的，是可逆的或是非可逆的，但不涉及DNA一级结构的变化 核酸分子杂交(hybridization):具有一定互补序列的不同来源的核苷酸单链在一定条件下，按照碱基互补配对原则形成异源双链的过程 印记技术 Southern blot : 检测目标DNA Northern blot : 定性分析mRNA 原位杂交: 在组织或细胞水平，使用标记探针与细胞内DNA或RNA杂交 反义核酸及药物 反义核酸作用原理 在细胞核中反义核酸与mRNA前体结合，影响mRNA的加工、阻挡成熟mRNA向细胞质的运输 在细胞质中反义核酸与靶mRNA结合，阻止核糖体与mRNA结合 在细胞质内反义核酸与mRNA结合形成双链，激活内源性RNase H，降解mRNA 反义DNA与靶细胞DNA双螺旋的调控区特异结合形成DNA三聚体，或与DNA编码区结合，终止正在转录的mRNA链延长 RNA干扰(RNA interference, RNAi) siRNA特点 长度约在22nt左右的双链RNA siRNA合成是由双链的RNA或RNA前体形成的。 依赖Dicer酶的加工，是Dicer的产物。在Dicer酶的加工过程中， siRNA来源于双链RNA的前体。是RISC组分 人工体外合成的siRNA，通过转染进入人体内，是RNA干涉的中间产物 siRNA可作用于mRNA的任何部位 siRNA只能导致靶标基因的降解，即为转录水平后调控 病毒核酸 * 核酸—以核苷酸为基本单位组成的生物大分子，是遗传信息的载体 所有的生命体均 含有核酸 RNA DNA 一级结构：DNA分子中脱氧核苷酸连接及其排列顺序，是物种间差异的根本原因 为RNA和蛋白质一级结构编码的信息 基因选择性表达的调控信息 5′ 3′ 结构式 5′ 3′ p p p p OH 3′ A C T G 1′ 线条式 5′ ACTGCATAGCTCGA 3′ 字母式 二级结构：是指通过分子间相互作用形成的双链DNA或称为双螺旋DNA 三级结构：双螺旋DNA进一步扭曲盘绕则形成其三级结构，超螺旋是DNA三级结构的主要形式 负超螺旋→双螺旋DNA松弛 正超螺旋→双螺旋DNA紧缠 拓扑异构酶Ⅰ 拓扑异构酶Ⅱ 转录、复制等的启动 三链DNA: DNA分子中的单链与双链相互作用形成的三链结构 基因表达抑制物：选择性阻断靶基因，抑制其转录 阻断序列专一性蛋白质的结合，影响DNA与蛋白质结合及DNA复制、转录 根据结构和功能，真核生物细胞的RNA主要分为： 信使RNA（messenger RNA，mRNA）； 转移RNA（transfer RNA，tRNA）； 核糖体RNA（ribosomal RNA，rRNA）； 细胞内小RNA（intracellular small RNA） 按照编码功能分类： 编码RNA：从编码蛋白质的基因转录而来，能够被翻译成蛋白质的RNA 。仅由mRNA分子组成 非编码RNA：rRNA、tRNA和细胞内其他小分子RNA 前体hnRNA修饰后