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大鼠尿液代谢组学分析方法的建立 高晓燕 （北京中医药大学科研实验中心 北京，100029） [摘要] 目的：采用反相液相色谱- 电喷雾质谱（RP-LC/ESI-MS ）和亲水作用液相色谱- 电喷雾质谱 （HILIC/ESI-MS ）相结合的方法建立尿液大鼠尿液代谢组学研究数据检测方法。方法：RP-LC 最佳色谱条 件为：色谱柱：Prevail C18 （4.6 mm × 250 mm ，5 μm ）；柱温：25 °C ；流动相A ：10 mmol⋅L-1 甲酸铵缓冲 液（甲酸调pH 4.0 ）；B ：0.1% 甲酸乙腈，A 与 B 梯度洗脱；HILIC 最佳色谱条件为：色谱柱：Alltima HP HILIC （2.1 mm × 150 mm，3 μm ）；柱温：25 ℃；流动相A ：10 mmol⋅L-1 甲酸铵缓冲液（甲酸调pH 4.0 ）；B ：0.1% 甲酸乙腈，A 与 B 梯度洗脱；质谱条件：ESI 离子源，离子源温度 350 ℃，毛细管电压 3.5 kV，雾化压力 50.0 psi，干燥气流速 11.0 L⋅min-1 ，质谱扫描范围 m/z 15 ~2 200 ，正、负离子检出模式。结果：RP-LC/ESI-MS 和 HILIC/ESI-MS 两种色谱系统同时应用对大鼠尿液中极性不同的内源性物质实现了较为全面的检测。结 论：该方法可为代谢组学研究中数据采集的全面性提供参考。 [关键词] 代谢组学；反相液相色谱- 电喷雾质谱；亲水作用液相色谱- 电喷雾质谱；检测方法 The establishment of a RP-LC/ESI-MS combained with HILIC/ESI-MS method for the 1 research of metabonomics of rat urine GAO Xiao-ya （Center of Scientific Experiment Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China) [Abstract] Objective: To establish a RP-LC/ESI-MS combined with HILIC/ESI-MS method for the research of metabonomics. Methods: For RP-LC/ESI-MS, the assay was conducted on a Prevail C18 (4.6 mm × 250 mm ，5 μm). The mobile phase A was 10 mmol⋅L-1 ammonium formate (adjusted to pH4 with formic acid) in water, B was acetonitrile: formic acid (99.9:0.1, v/v). A gradient elution mode composed of A and B was used as the mobile phase. For HILIC/ESI-MS, the assay was conducted on a Alltima HP HILIC (2.1 mm × 150 mm ，3 μm).The mobile phase A was 10 mmol⋅L-1 ammonium formate (adjusted to pH4 with formic acid) in water, B was acetonitrile: formic acid (99.9:0.1, v/v). A gradient elution mode composed of A and B was also used as the mobile phase. Electrospray ionization (ESI) in the positive and negative ion mode was used