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大黄蟪虫丸微生物限度检查法的建立 林丽英 陈浩桉 J’．尔省药品检验所广州510180 摘要： 目的：通过对人黄蠊虫丸微生物限度检夯法的建立和方法验证，为抗菌消炎类中成 药微生物限度检卉法的建立提供有效的科学依据，为2005版中国约典实施时，该类约晶微 生物限度检查法的建立和验证提供原则性指导；由此探索山人黄蟪虫丸的抗菌谱，为该晶种 的临床川约研究提供实Jlj的参考。方法：采川增人供试液的稀释度与培养基稀释法相结合， 对各规定的试验凶株作州收率试验，以验证所建立的方法的科学性署ll可行性。 结果：人黄 蠛虫丸对金黄色葡萄球凶及枯草芽孢杆菌有较强的抑制作用。对人肠埃希菌的抑制作川很 微弱；而对向色念珠菌和黑曲霉菌儿乎无抑制作用。证明该品种的抗菌谱为革兰氏附|生菌。 川增人供试液的稀释皮和培养基稀释法相结合，。可消除人黄蠊虫丸在试验条什卜．的抑’凶作 ～ JIj，从而顺利检出该品种所污染的各科·微生物。 关键词：人黄蛾虫丸；微生物限度检夯：方法验证 ． 2000版药典收载的微生物限度检查法¨‘，其检查结果只能较真实的反映一般约黼污染微 生物的情况，而对具有抑菌作刚的约品，由丁在试验条件‘卜．存在对待检菌的干扰，使检夯结 果1；能真实的反映：【j约卅。中污染的微生物的种类和数量。冈此2005版约典规定㈦i：进行药『!f^ 微生物限度检夯时，要求按已验证的方法进行检查，这就需要为每个品种建立适。茂的微生物 限度枪布法。对丁．有抑随作州的尚种，必须采取一定的措施，如增人供试液的稀释度、培养 然稀释法、薄膜过滤法、离心沉淀法或中和I法””等等，对供试品进行处理，使药品的抑凶作 川扫：检验条fi，l：I、‘消除或可忽略不计，从而提高微生物的检出率，顺利检出该类约黼所污染的 各种微生物，更好的控制约-铺的质姑，保证人吣的州药安全。本文通过对人黄蠊虫丸微生物 限度检奄法的建立，并对所建立的方法进行验证，为抗菌消炎类中成约微生物限度检j内!法的 建立提供有效的科学依据。为实施2005版中国药典时，该类药品微生物限度检查法的建立 和方法验证提供原则性指导。并由此得到人黄蛾虫丸的抗菌谱，可作为该品种临床川约研究 的参考。 1 实验材料 1．1．菌种 MCC(B)44 MC 人肠埃希汹(C 102)；枯草芽孢杆菌(CC(B)63 501)：金黄色葡镝 MC Mc 球菌(c C(B)26003)；乙趔付伤寒沙门菌(cc(B)50 094)；白色念珠凶(C 7】 MC MCC(F)98 C(F)10123)；黑曲霉(C003)均为国家菌种保藏中心提供。 ‘ 1．2．培养基及试剂 营养肉汤培养基、真菌培养基、营养琼脂培养基、真菌琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养 基、胆盐乳糖增菌液培养基、MUG培养基、胆盐乳糖发酵培养基、四硫磺酸钠亮绿培养基、 胆盐硫乳琼脂、曙红弧甲蓝琼脂培养基及二糖铁琼脂培养基等均由中国药品生物制品检定所 监制的北京二约科技开发公司生产。 1．3．仪器及设备 均使川J“尔省约品检验所微生物实验室的仪器及设备。该实验室已通过国家实验室认可 委员会的认可。 1．4样品 2菌液的制备：心‘ - 接种人肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中， 置30、35。C培养20-24 d,n-／：接种白色念珠菌的新鲜培养物至真菌培养基中，23、28C培养 悬凶液，备川。接种黑曲霉的新鲜培养物至真菌琼脂斜面培养基中培